Desarrollo y validación de un ensayo farmacodinámico ex-vivo y su aplicación para evaluar la actividad de inhibidores de la calcificación cardiovascular en estudios preclínicos y clínicos
[spa] La calcificación cardiovascular (CCV) es un proceso patológico complejo y activo consistente en la formación de depósitos minerales de fosfato cálcico en forma de hidroxiapatita que provocan un engrosamiento y una pérdida de elasticidad de las paredes arteriales y de las válvulas cardíacas. En...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2021 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/674601 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10803/674601 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Calcificación cardiovascular Calcifilaxis Diálisis/hemodiálisis Enfermedad renal terminal Farmacocinética Farmacodinamia Myo-inositol hexafosfato SNF472 Litiasi renal i biomineralització 616.6 |
| Sumario: | [spa] La calcificación cardiovascular (CCV) es un proceso patológico complejo y activo consistente en la formación de depósitos minerales de fosfato cálcico en forma de hidroxiapatita que provocan un engrosamiento y una pérdida de elasticidad de las paredes arteriales y de las válvulas cardíacas. En condiciones normales, la CCV no ocurre de forma significativa ya que existe un balance entre los promotores y represores de la calcificación. En cambio, cuando hay alteraciones fisiológicas, como consecuencia de determinadas patologías o del envejecimiento, puede existir un desequilibrio entre dichos factores que provoca la degeneración del sistema cardiovascular. La CCV acelerada es una complicación grave de la enfermedad renal crónica que contribuye a una alta morbilidad y mortalidad, especialmente en pacientes sometidos a diálisis. De hecho, al menos el 80% de estos pacientes sufren algún tipo de CCV. Actualmente no existe ningún tratamiento aprobado para prevenir y tratar la progresión de la CCV en enfermedades relacionadas con esta complicación en pacientes en diálisis. Por tanto, es necesaria la búsqueda de nuevos biomarcadores para evaluar la efectividad de nuevas terapias de intervención para tratar la CCV en ensayos clínicos. El SNF472 es una formulación intravenosa de myo-inositol hexafosfato, un inhibidor selectivo de la formación y el crecimiento de la hidroxiapatita, que se está desarrollando para tratar enfermedades relacionadas con la CCV, como la calcifilaxis y la enfermedad arterial periférica, en pacientes dializados. Así pues, el objetivo general de esta tesis fue desarrollar y validar una técnica espectrofotométrica in vitro/ex vivo para evaluar el potencial de cristalización de fosfato de calcio en plasma, y establecer una relación entre la inhibición de la CCV in vivo y la inhibición de la cristalización ex vivo a nivel preclínico y clínico usando el SNF472 como inhibidor. Para alcanzar este objetivo, realizamos un conjunto de ensayos para desarrollar y poner a punto un nuevo método de farmacodinamia para determinar el potencial de cristalización de fosfato de calcio en plasma humano, y evaluamos su respuesta en muestras de plasma con diferentes inhibidores/represores de la cristalización. Posteriormente, validamos dicha técnica in vitro en plasma de voluntarios sanos usando el SNF472 como inhibidor, y comprobamos su aplicabilidad en plasma de rata. También hemos comparado la respuesta del ensayo en muestras de plasma de voluntarios sanos y pacientes en tratamiento de hemodiálisis. Adicionalmente, hemos realizado un conjunto de experimentos in vivo en ratas: un estudio farmacocinético por infusión intravenosa de SNF472; un estudio para optimizar el modelo patológico animal para inducir la CCV por vitamina D; dos estudios de eficacia para evaluar el efecto del SNF472 en la prevención de la CCV; y un último estudio para evaluar el efecto del SNF472 en la inhibición de la progresión de la CCV inducida por vitamina D. Finalmente, llevamos a cabo el análisis de farmacodinamia y farmacocinética en el marco de dos ensayos clínicos de fase 2 con SNF472, y buscamos correlaciones entre las concentraciones de SNF472, la eficacia clínica y la inhibición de la cristalización ex vivo con el método validado. En conclusión, los resultados de estos estudios nos han permitido obtener un ensayo de farmacodinamia in vitro/ex vivo para determinar el potencial de cristalización de fosfato de calcio en plasma humano y de rata. Además, hemos demostrado la correlación de los resultados del ensayo ex vivo tanto con la inhibición de la calcificación in vivo en rata como con la eficacia clínica en pacientes en tratamiento de diálisis. Por tanto, este método no invasivo podría ser utilizado para evaluar desde fases preclínicas y clínicas muy tempranas los potenciales efectos terapéuticos de inhibidores de la calcificación, como el SNF472, en enfermedades relacionadas con la CCV. |
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