Exosomas urinarios
AntecedentesLos biomarcadores actuales en la nefritis lúpica (NL) no son lo suficientemente sensibles oespecíficos para predecir la evolución renal. Datos recientes abalan el uso de los exosomasurinarios como fuente de biomarcadores de origen renal, con especial relevancia en sucontenido de miRNAs....
| Autor: | |
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| Tipo de documento: | tese |
| Data de publicação: | 2020 |
| País: | España |
| Recursos: | Universitat Autònoma de Barcelona |
| Repositório: | Dipòsit Digital de Documents de la UAB |
| Idioma: | espanhol |
| OAI Identifier: | oai:ddd.uab.cat:233879 |
| Acesso em linha: | https://ddd.uab.cat/record/233879 |
| Access Level: | Acceso aberto |
| Palavra-chave: | Aparell urinari Ronyons Lupus eritematós Marcadors bioquímics |
| Resumo: | AntecedentesLos biomarcadores actuales en la nefritis lúpica (NL) no son lo suficientemente sensibles oespecíficos para predecir la evolución renal. Datos recientes abalan el uso de los exosomasurinarios como fuente de biomarcadores de origen renal, con especial relevancia en sucontenido de miRNAs. Algunos estudios han identificado varios miRNAs asociados con laactividad de la enfermedad y la formación de fibrosis, pero no se han realizado estudios sobrebiomarcadores de pronóstico.MétodosPara identificar biomarcadores pronóstico, realizamos una micromatriz de miRNA en exosomasurinarios de pacientes con NL activa, analizando los resultados en función de la respuesta altratamiento presentada por los pacientes (7 respondedores y 7 no respondedores). Los estudiosde validación se realizaron mediante técnica de RT-qPCR en una nueva cohorte de LN(respondedores = 21 y no respondedores = 22). Entre los miRNAs de interés se realizó unestudio comparativo con los niveles séricos así como con una cohorte de pacientes sanos y otrade nefropatías no lúpicas. Posteriormente se realizó hibridación in situ de tejido renal y estudiosin vitro para identificar el origen, diana celular y el mecanismo de acción de estos exosomas anivel renal. Para cada miRNA expresado diferencialmente, los genes diana potenciales fueronpredichos a través del estudio de conjuntos de datos de miRNA.ResultadosLos pacientes que respondieron a la pauta de tratamiento estándar expresaron nivelessignificativamente mayores de miR-31-5p, miR-107 y miR-135b-5p en la orina y en tejido renalen comparación con los no respondedores. El miR-135b-5p mostró el mejor valor predictivopara discriminar a los pacientes que respondieron (AUC = 0.783 [intervalo de confianza del95%, 0.640 - 0.926], al valor de corte > 0.0884 con una sensibilidad del 77.8% y especificidaddel 71.4%). La expresión de los miRNAs se localizó principalmente en la estructura tubular,demostrándose, además, una mayor formación de exosomas enriquecidos con miR-31-5p, miR-107 y miR-135b-5p a nivel de esta estirpe en comparación con la de células endotelialesglomerulares o mesangiales (p < 0,0001). En cuanto a la diana de estos exosomas, su observóuna velocidad de internalización de los derivados de orina de pacientes respondedores superior alos de no respondedores tanto a nivel de las células endoteliales glomerulares como mesangiales(p = 0,001 y 0,0002), siendo además superior la capacidad de internalización a nivel de lascélulas mesangiales englobadas (90% frente a 50%, p < 0,0001). El miR-135b-5p demostrócapacidad en la inhibición de la proliferación de las células mesangiales (p < 0.01). Además, elanálisis de las distintas dianas biológicas pudo demostrar de forma global un papel de estosmiRNAs en la modulación de la respuesta inflamatoria, con reducción de los niveles decitoquinas, quimioquinas y moléculas de adhsesión, un cierto efecto en la modulación sobre laangiogénesis, así como una marcada capacidad antifibrosante. El análisis de la vía identificónueve dianas comunes relevantes para la recuperación renal, una de ellas, HIF-1α, común paralos 3 miRNA de interés. Los 3 miRNAs demostraron un efecto modulador sobre la vía del HIF-1α a través de su inhibición.ConclusionesLos niveles de miR-135b-5p, miR-31-5p y miR-107 son capaces de predecir la respuesta altratamiento en el momento del brote y evolutivamente en los pacientes afectos de NL, de formaespecífica. El origen de estos parecería situarse a nivel de las células tubulares mientras que lasmesangiales y endoteliales glomerulares se presentarían como las principales efectoras de susacciones biológicas. HIF-1α fue identificado como diana común de estos 3 miRNAs,ocasionando la presencia de estos miRNAs una supresión a nivel de la expresión de esta vía,considerando clave en la patogénesis de la NL. |
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