Caracterización genotípica y fenotípica de mutantes de receptores de ABA de Nicotiana benthamiana obtenidos por mutagénesis con CRISPR/Cas9
[ES] El ácido abscísico (ABA) es la hormona vegetal que regula la transpiración y la apertura estomática bajo estrés por sequía. Por lo tanto, es de vital importancia ahondar en el conocimiento que poseemos sobre el ABA y su vía de señalización asociada para poder mejorar la eficiencia en el uso del...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Fecha de publicación: | 2023 |
| País: | España |
| Institución: | Universitat Politècnica de València (UPV) |
| Repositorio: | RiuNet. Repositorio Institucional de la Universitat Politécnica de Valéncia |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:riunet.upv.es:10251/191744 |
| Acceso en línea: | https://riunet.upv.es/handle/10251/191744 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | ABA PYL Sequía Nicotiana benthamiana Receptores de ABA Edición génica CRISPR/Cas9 Tetraploide Sensibilidad a ABA Drought ABA receptors Gene editing Tetraploid ABA sensitivity BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Máster Universitario en Biotecnología Molecular y Celular de Plantas-Màster Universitari en Biotecnologia Molecular i Cel·lular de Plantes |
| Sumario: | [ES] El ácido abscísico (ABA) es la hormona vegetal que regula la transpiración y la apertura estomática bajo estrés por sequía. Por lo tanto, es de vital importancia ahondar en el conocimiento que poseemos sobre el ABA y su vía de señalización asociada para poder mejorar la eficiencia en el uso del agua de las plantas de cosecha de cara a los efectos del cambio climático. La unión del ABA entre los loops gate y latch de los receptores PYR/PYL desencadena la formación del complejo ternario de alta afinidad receptor-ABA-PP2C, que provoca la inactivación de la fosfatasa PP2C y pone en marcha las cascadas de señalización aguas abajo, con respuestas tanto genómicas como no genómicas. En el presente estudio, se llevó a cabo la caracterización genotípica y fenotípica de mutantes de pérdida de función en varios receptores de la familia PYR/PYL de la planta alotetraploide Nicotiana benthamiana. Todas las líneas analizadas tenían cinco mutaciones, localizadas en los genes NbPYL1a, NbPYL1b, NbPYL8a, b y c. De entre ellas, la línea mutante 10K2.7_8/pent3 fue escogida para su caracterización fenotípica. Las semillas de las plantas pent3 mostraron insensibilidad en la germinación y el establecimiento con respecto a N. benthamiana ecotipo silvestre (WT5), usada como control, en presencia de una concentración moderada de ABA. Por otro lado, se midieron otras respuestas a ABA como son la longitud de la raíz, el número de raíces laterales y el peso fresco tanto de la parte radicular como de la parte aérea en ambas líneas en presencia de agonista X, que se une específicamente a receptores de tipo PYL8. Después de 13 días en contacto con el compuesto, la raíz primaria alcanzó una longitud mayor en pent3, mientras que no se observaron diferencias destacables con WT5 en el peso fresco de la parte radicular en conjunto. En cuanto a las raíces laterales, las diferencias entre ambas líneas tampoco fueron significativas; sin embargo, el peso fresco de la parte aérea sí que era mayor en pent3, con unos 12 mg de diferencia con WT5. Estos resultados indican la existencia fenotipos de insensibilidad parcial a ABA y a agonistas de los receptores de ABA en los mutantes péntuples de genes PYR/PYL estudiados, lo cual pone de manifiesto sus alteraciones en la vía de señalización de ABA y refleja un control redundante de los receptores PYR/PYL sobre la vía en Nicotiana benthamiana. |
|---|