Mitochondria-to-cytosol H2O2 fluxes in redox biology
Los efectos del H2O2 en la fisiología celular, como oxidante y como señalizador es un campo que aún esta en expansión. Para intentar desvelar como ocurren estos fenómenos, hemos utilizado sondas codificadas genéticamente que son capaces de detectar concentraciones nano molares de H2O2. Para poder de...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2024 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/690220 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10803/690220 |
| Access Level: | acceso embargado |
| Palabra clave: | H2O2 Sondas codificadas geneticamente HyPer roGFP2 Señalización Genetically-encoded reporters Signaling 575 |
| Sumario: | Los efectos del H2O2 en la fisiología celular, como oxidante y como señalizador es un campo que aún esta en expansión. Para intentar desvelar como ocurren estos fenómenos, hemos utilizado sondas codificadas genéticamente que son capaces de detectar concentraciones nano molares de H2O2. Para poder desarrollar esta propuesta, primero hemos creado una nueva sonda de la familia de los roGFP, fusionando la peroxiredoxina de Schizosaccharomyces pombe Tpx1. Esta sonda llamada roGFP2-Tpx1.C169S ha resultado ser la mas sensible para detectar en el citosol cambios metabólicos que modifican el estado redox de la célula. Con ella hemos conseguido valorar comparando expresión en diferentes eucariotas que el gradiente de H2O2 extracelular-intracelular es similar en todos ellos, en torno a 300:1, y que las concentraciones fisiológicas de H2O2 estarían sobre 3 nM. En combinación con la sonda HyPer7 hemos establecido que los niveles de H2O2 son mas elevados en la matriz mitocondrial y que Tpx1, es la proteína que gobierna los gradientes inter compartimentales. Aprovechando esta información y con una nueva herramienta quimio genética hemos expresado dentro de la mitocondria un generador de H2O2. Así, hemos podido caracterizar así los gradientes de salida de H2O2 de la mitocondria, y las señales antiestrés que se pueden activar. |
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