Ultraviolet light (UV-C) as a redundant biosafety step for pathogen inactivation in the manufacturing process of spray dried plasma from animal origin
El plasma dessecat per atomització (SDP) és una font de proteïnes funcionals obtinguda a partir de sang d’animals sans, aprovats per les autoritats veterinàries per al consum humà. La sang es recull a l'escorxador, es tracta amb anticoagulant, es refreda i es transporta a instal·lacions industr...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2019 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/667360 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10803/667360 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | UV-C Hemoderivats Hemoderivados Hemoderivatives Bioseguretat Bioseguridad Biosafety Ciències de la Salut 663/664 |
| Sumario: | El plasma dessecat per atomització (SDP) és una font de proteïnes funcionals obtinguda a partir de sang d’animals sans, aprovats per les autoritats veterinàries per al consum humà. La sang es recull a l'escorxador, es tracta amb anticoagulant, es refreda i es transporta a instal·lacions industrials on es centrifuga per separar els glòbuls vermells de la fracció plasmàtica. Després, el plasma es concentra i s'asseca a altes temperatures (80ºC) per convertir-lo en pols. Aquest mètode conserva l’activitat biològica de les proteïnes. El SDP s’utilitza principalment en dietes de porcí per millorar significativament el guany diari, la ingesta, l’eficiència productiva i per reduir el retard causat per l’aparició de diarrea després del deslletament. Tot i que el SDP es considera un producte segur i el seu procés de fabricació consta diverses etapes de bioseguretat, la seva seguretat sovint es qüestiona donada la seva naturalesa de subproducte hemoderivat, especialment quan apareixen patògens emergents o reemergents. Aquesta tesi doctoral es va centrar en l'avaluació i la validació d'una nova etapa redundant d'inactivació de patògens per a implementar en el procés de producció de SDP, la irradiació UV-C. El treball ha consistit en avaluar l’efectivitat del tractament per irradiació UV-C mitjançant un dispositiu de flux turbulent, SurePure TurbulatorTM, a l’irradiar un plasma natiu inoculat artificialment amb diferents patògens d’interès per a la indústria porcina. Als estudis 1 i 2 es va avaluar l’efecte UV-C sobre la supervivència de Salmonella typhimurium, S. choleraesuis, Enterococcus faecium i Escherichia coli K88 i K99 sotmesos a diferents dosis UV-C. Es van trobar cinètiques d'inactivació no lineal amb un valor de reducció de 4 log10 (4D), proper a 3000 J/L en tots els casos. A l’estudi 3 es va analitzar l’efecte de l’UV-C sobre diferents virus d’interès en la indústria del porcí. La selecció de virus amb envolta va incloure el Virus de la pseudoràbia (PRV), el Virus de la síndrome respiratòria i reproductiva porcina (PRRSV), el Virus de la diarrea epidèmica porcina (PEDV), el Virus de la diarrea viral bovina, el Virus de la grip porcina (SIV) i el Virus de la pesta porcina clàssica (CSFV); i, com a virus sense envolta, el Parvovirus porcí (PPV), Virus de la malaltia vesicular de porc (SVDV), Circovirus porcí 2 (PCV-2) i Senecavirus A (SVA). Tots aquests virus van ser sotmesos a diferents dosis UV-C i, mitjançant la titulació de les mostres, es va construir la seva corba d'inactivació. En termes generals, els resultats van mostrar que els virus amb envolta tenen una sensibilitat superior a l’UV-C, amb valors 4D inferiors a 2000 J/L, que els que no presenten envolta, presentant valors propers a 3000 J/L o més. A l’estudi 4 es va dur a terme un bioassaig utilitzant diferents grups de garrins, inoculats intraperitonealment amb plasma irradiat per UV-C a 0 J/L (plasma no tractat), 3000 i 9000 J/L. Els resultats van mostrar que cap dels porcs dels grups que rebien el plasma irradiat per UV-C es va infectar ni va seroconvertir en front als virus detectats al plasma inicial (PCV-2, PRRSV (soques europees), SIV, PPV, Virus de l’hepatitis E i Rotavirus A), confirmant així l’eficàcia de l’UV-C. Alhora, es varen dissenyar mètodes convencionals de PCR per amplificar amplicons llargs dels genomes de PCV-2 i PEDV. Mitjançant la comparació dels resultats amb els de PCRs quantitatives, es va demostrar que l’UV-C va ser capaç de danyar el genoma viral. Els resultats globals de la present tesi doctoral mostren que l’aparell d’UV-C SurePure TurbulatorTM és eficaç inactivant un ampli ventall de bacteris i virus presents de forma natural en plasma animal líquid recollit d’escorxadors comercials. |
|---|