Selección y caracterización de aptámeros de DNA frente a la IgG de ratón
Las inmunoglobulinas son dianas de gran interés para el desarrollo de aptámeros por sus múltiples aplicaciones diagnósticas y terapéuticas, pero la obtención de ligandos frente a IgG con alta afinidad y especificidad sigue siendo un reto. En este trabajo se abordó la selección de aptámeros de ADN fr...
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| Tipo de recurso: | artículo |
| Fecha de publicación: | 2026 |
| País: | España |
| Institución: | Universidad de Alcalá (UAH) |
| Repositorio: | e_Buah Biblioteca Digital Universidad de Alcalá |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:dnet:ebuahbibliot::d22ebb8fa29c6bf632b4e62e1635f924 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10017/69016 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Aptámeros SELEX IgG murina NGS G-cuádruplex Medicina Medicine |
| Sumario: | Las inmunoglobulinas son dianas de gran interés para el desarrollo de aptámeros por sus múltiples aplicaciones diagnósticas y terapéuticas, pero la obtención de ligandos frente a IgG con alta afinidad y especificidad sigue siendo un reto. En este trabajo se abordó la selección de aptámeros de ADN frente a IgG de ratón mediante una estrategia SELEX optimizada. Para ello, se empleó una mezcla de IgG murinas nativas (IgG1, IgG2a e IgG2b) inmovilizadas en partículas magnéticas carboxiladas, con contraselección frente a otras IgG y fragmentos F(ab’)2, y un esquema de selección con condiciones progresivamente más estrictas. El seguimiento por qPCR y curvas de melting mostró una disminución de la heterogeneidad poblacional y un desplazamiento de la Tm hacia 80 °C, patrón compatible con enriquecimiento en secuencias más estables; con base en ello se secuenciaron por NGS rondas intermedias y finales. El análisis bioinformático permitió identificar familias enriquecidas y priorizar candidatos, de los que varios mostraron contenido GC elevado, estructuras secundarias estables (ΔG entre –10.5 y −19.70 kcal/mol), potencial para formar motivos G-cuádruplex y valores de Kd en el rango nanomolar bajo. En conjunto, los resultados indican que la estrategia empleada permite superar las limitaciones de aproximaciones previas y obtener aptámeros frente a IgG de ratón con propiedades prometedoras para su aplicación como ligandos alternativos en ensayos de inmunodetección. |
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