In vitro diagnostic designs for applications in health care

L'interès creixent per noves proves in vitro es justifica per la necessitat de nous diagnòstics ràpids específics i sensibles. Aquesta demanda s'ha tornat especialment important en resposta a l'augment de la prevalença de malalties emergents. L'objectiu d'aquesta tesi és, do...

ver descrição completa

Detalhes bibliográficos
Autor: Bernuz, Mireia|||0000-0002-2052-6902
Tipo de documento: tese
Data de publicação:2024
País:España
Recursos:Universitat Autònoma de Barcelona
Repositório:Dipòsit Digital de Documents de la UAB
Idioma:inglês
OAI Identifier:oai:ddd.uab.cat:296801
Acesso em linha:https://ddd.uab.cat/record/296801
Access Level:Acesso embargado
Palavra-chave:Biomarcador
Biomarker
Biosensor
Test de diagnòstic ràpid
Rapid diagnostic test
Test de diagnóstico rápido
Ciències de la Salut
Descrição
Resumo:L'interès creixent per noves proves in vitro es justifica per la necessitat de nous diagnòstics ràpids específics i sensibles. Aquesta demanda s'ha tornat especialment important en resposta a l'augment de la prevalença de malalties emergents. L'objectiu d'aquesta tesi és, doncs, explorar l'ús de diferents biomarcadors per al disseny de proves in vitro en aplicacions per a l'atenció mèdica, incloent malalties tant infeccioses com no infeccioses. Actualment, hi ha diverses estratègies comercials per a la seva detecció, però el seu alt cost, instrumentació especialitzada i procediments complexos en dificulten l'accessibilitat en centres d'atenció primària. Per tant, sorgeix la necessitat de desenvolupar mètodes de detecció alternatius basats en nous biomarcadors per al diagnòstic primerenc. Aquesta tesi se centra a explorar diferents biomarcadors: els microRNAs (miRNAs), el RNA missatger (mRNA) i els exosomes. En ella s'han desenvolupat mètodes de detecció específics per a cada biomarcador, utilitzant biòpsies líquides i partícules magnètiques, que han permès procediments mínimament invasius per a la recol·lecció de mostres i han simplificat el protocol en reduir la complexitat dels equips usats. A més, el rendiment analític també ha millorat en preconcentrar l'analit i minimitzar l'efecte de la matriu. La primera aproximació s'ha centrat en els miRNAs com a biomarcadors per a la detecció de càncer. S'ha desenvolupat un assaig competitiu de miRNA magnetic enzimàtic per detectar els miRNA21 i miRNA27a dins dels exosomes, coneguts per tenir un augment en la seva expressió en el càncer de mama. La segona aproximació explora l'RNA missatger de l'interferó gamma per avaluar la resposta immune cel·lular, especialment rellevant durant la pandèmia de SARS-CoV-2. En aquest assaig, es va aconseguir reduir el temps d'incubació al mesurar els nivells d'mRNA en comptes de les proteïnes secretades. Aquest mètode, provat amb la infecció per SARS-CoV-2, simplifica l'avaluació i podria ajudar al pronòstic. La tercera aproximació investiga els exosomes derivats de neurones per al diagnòstic primerenc de la malaltia d'Alzheimer. Per això s'ha desenvolupat un immunoassaig magnètic per a proteïnes de membrana, utilitzant biomarcadors específics de neurones i la detecció de la proteïna beta-secretasa. Totes les estratègies estudiades en aquesta tesi apropen els diagnòstics als centres datenció primària i entorns amb recursos limitats. En resum, la tesi té com a objectiu contribuir al desenvolupament de plataformes in vitro per a la quantificació de tot tipus de biomarcadors, que es poden adaptar fàcilment a desafiaments emergents. Aquesta característica podria ser particularment interessant amb l'arribada d'una altra pandèmia, on el desenvolupament ràpid de noves estratègies de diagnòstic podria ser necessari.