Caracterización de la familia de proteínas quinasas CLK (CLK/STY, CLK2, CLK3 y CLK4) y su implicación en el control de la diferenciación en células de la eritroleucemia murina

Leída en la Universidd Complutense de Madrid. Facultad de Ciencias Biológicas el 10-27-2004; 124 págs.

Detalles Bibliográficos
Autor: García-Sacristán, Ana
Tipo de recurso: tesis doctoral
Fecha de publicación:2004
País:España
Institución:Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC)
Repositorio:DIGITAL.CSIC. Repositorio Institucional del CSIC
OAI Identifier:oai:digital.csic.es:10261/40283
Acceso en línea:http://hdl.handle.net/10261/40283
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:proteínas quinasas CLK
eritroleucemia murina
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spelling Caracterización de la familia de proteínas quinasas CLK (CLK/STY, CLK2, CLK3 y CLK4) y su implicación en el control de la diferenciación en células de la eritroleucemia murinaGarcía-Sacristán, Anaproteínas quinasas CLKeritroleucemia murinaLeída en la Universidd Complutense de Madrid. Facultad de Ciencias Biológicas el 10-27-2004; 124 págs.Uno de los objetivos del laboratorio donde se ha llevado a cabo el presente trabajo de Tesis es la identificación de genes implicados en la diferenciación eritropoyética utilizando como modelo de estudio el sistema de diferenciación inducible de células MEL. Mediante una librería diferencial de cDNA de células MEL pre-diferenciadas se ha identificado el gen cIklSTY como un gen que activa su expresión en las etapas tempranas de la diferenciación. ClklSTY es una proteína quinasa capaz de fosforilar residuos de serina, treonina así como de tirosina. Mediante splicing alternativo del exón 4,c1k1STYes capaz de generar dos transcritos. La inclusión del exón 4 da lugar a una proteína catalíticamente activa, mientras que la exclusión del exón genera una isoforma truncada. En la presente Tesis Doctoral se ha demostrado que clk/STY así como los otros miembros de la familia c1k (clk2, cIk3 YcIk4), aumentan su expresión en células MEL diferenciadas. Mediante ensayos de RT-PCR se ha observado que el aumento de expresión es causado tanto por el transcrito completo como por el truncado. En el caso de C\klSTY, se ha detectado un cambio en la relación de los productos de :-,plicing. Así, en células no diferenciadas y en las primeras etapas de la diferenciación el transcrito completo es mayoritario, sin embargo, en las etapas finales existe mayor expresión del transcrito truncado. Asimismo, se ha demostrado que el aumento de exclusión del exón 4 es independiente de la acción del agente inductor y está relacionado directamente con el grado de diferenciación de las células. Mediante estudios in silico se han localizado sitios consenso de unión de las proteínas reguladoras del If)/¡cing alternativo, las proteínas SR y PTB, en lo intrones que flanquean el exón 4 y en el propio exón 4 Mediante ensayos con transfectantes estables que sobreexpresan clk/STY se ha demostrado que la exclusión del exón 4 de clk/STYUniversidad Complutense de Madrid. Facultad de Ciencias BiológicasPeer reviewedKrimer, Dora B.201120112004info:eu-repo/semantics/doctoralThesishttp://purl.org/coar/resource_type/c_db06http://hdl.handle.net/10261/40283reponame:DIGITAL.CSIC. Repositorio Institucional del CSICinstname:Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC)Españolinfo:eu-repo/semantics/openAccessoai:digital.csic.es:10261/402832026-05-22T06:33:51Z
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