Studies on transmissible viral proventriculitis in chickens
La proventriculitis viral transmissible (TVP) és una malaltia infecciosa viral emergent que afecta principalment a les gallines de graella. Es caracteritza per una digestió de l’alimentació deficient, un creixement deficient i una taxa de conversió de l’alimentació deficient, causant pèrdues econòmi...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2021 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/671982 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10803/671982 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | TVP Pollastre Pollo Chicken Proventricle Proventrículo Proventriculus Ciències de la Salut 619 |
| Sumario: | La proventriculitis viral transmissible (TVP) és una malaltia infecciosa viral emergent que afecta principalment a les gallines de graella. Es caracteritza per una digestió de l’alimentació deficient, un creixement deficient i una taxa de conversió de l’alimentació deficient, causant pèrdues econòmiques a la indústria avícola. En casos de TVP s’observa l’ampliació, engrossiment, fragilitat i pal·lidesa del proventriculus, juntament amb debilitat i dilatació de l’istme gàstric. Tot i que les lesions greus proventriculars poden ser indicatives de TVP, no són específiques. La malaltia es caracteritza per les seves lesions histològiques: necrosi de cèl·lules oxinticopèptiques, inflamació amb predomini de limfòcits i substitució de l’epiteli glandular per epiteli ductal hiperplàsic. Per tant, l’objectiu principal d’aquesta tesi era determinar la presència de la malaltia i del nou agent viral a les granges avícoles espanyoles i caracteritzar encara més aquest agent viral mitjançant estudis ultraestructurals i tècniques de seqüenciació de propera generació. En el primer estudi, la presència de CPNV en casos clínics de TVP de granges avícoles espanyoles es va avaluar retrospectivament del 1999 al 2019 en teixit proventricular FFPE. L’examen histopatològic, la RT-PCR de CPNV i el genoma de seqüència parcial de casos positius obtinguts mitjançant la seqüència de Sanger es va dur a terme en 42 casos clínics. A més, es va configurar una nova tècnica ISH com a nou mètode per detectar el virus. L’estudi va identificar la presència de CPNV a les granges de pollastres espanyoles des de 1999 com a mínim. A més, deu proventriculi de set casos clínics diferents van ser positius per a CPNV RT-PCR i ISH, i tots ells van mostrar els trets histopatològics característics de TVP (necrosi de l’oxinticopèptic inflamació intersticial de les cèl·lules i de les glàndules). Els estudis filogenètics van demostrar que les seqüències parcials de CPNV espanyoles estaven molt relacionades amb les seqüències CPNV disponibles del Regne Unit i els EUA. El segon estudi d’aquesta tesi tenia com a objectiu identificar, visualitzar i localitzar l’agent causant de TVP mitjançant l’ús de TEM. Es van utilitzar mostres proventriculars de dotze casos clínics diferents. Vuit de les mostres van ser positives per RT-PCR i ISH a CPNV, mentre que les altres tres, tot i que presentaven una lesió brut i microscòpica coherent amb TVP, van ser negatives per a CPNV ISH i RT-PCR. Es van observar virus icosaèdrics de 70 nm, no embolcallats, intranuclears i / o intracitoplasmàtics en quatre mostres. Dues d’aquestes mostres van ser negatives per al CPNV mitjançant mètodes moleculars, mentre que les altres dues van donar resultats positius a les tècniques de RT-PCR i ISH CPNV. Aquests resultats, juntament amb la troballa de virions als nuclis de les cèl·lules infecetd, una troballa que no es sol veure en els virus d’ARN, van plantejar la qüestió de si TVP també podria ser causada per un altre agent viral simultàniament o sense la contribució de CPNV. Per entendre encara més aquesta última hipòtesi, es va fer un tercer estudi per caracteritzar encara més el genoma dels virus implicats en els casos de TVP. Es van estudiar vuit mostres de proventriculi de TVP per NGS i es van trobar seqüències parcials o completes del segment B de CPNV en tots ells, confirmant la implicació d’aquest virus en casos clínics de TVP. No obstant això, en cinc dels casos, es van trobar seqüències parcials d’adenovirus A aviari, en particular els dos casos en què s’havien observat virions intranuclears per TEM. Aquests resultats confirmen la hipòtesi que l’adenovirus A aviari pot estar present en casos clínics de TVP, tot i que el seu paper en el desenvolupament de la malaltia necessita estudis addicionals. |
|---|