Regulación de la biosíntesis de isoprenoides en Arabidopsis thaliana: Caracterización del mutante rif35

[spa] Las plantas sintetizan una gran variedad de compuestos isoprenoides esenciales para su crecimiento y desarrollo. Sin embargo, la mayoría de los isoprenoides vegetales se incluyen en el grupo de los metabolitos secundarios y juegan un papel relevante en las interacciones de las plantas con su e...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Villavicencio Contreras, Idalia Lizbeth
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2015
País:España
Institución:Universidad de Barcelona
Repositorio:Dipòsit Digital de la UB
OAI Identifier:oai:diposit.ub.edu:2445/68359
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/2445/68359
http://tdx.cat/handle/10803/325411
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Arabidopsis thaliana
Metabolisme de les plantes
Cloroplasts
Genòmica
Isoprenoides
Plant metabolism
Chloroplasts
Genomics
Isopentenoids
Descripción
Sumario:[spa] Las plantas sintetizan una gran variedad de compuestos isoprenoides esenciales para su crecimiento y desarrollo. Sin embargo, la mayoría de los isoprenoides vegetales se incluyen en el grupo de los metabolitos secundarios y juegan un papel relevante en las interacciones de las plantas con su entorno. Algunos isoprenoides vegetales también son relevantes por su interés biotecnológico. A nivel metabólico todos los isoprenoides se sintetizan a partir de los precursores de 5 átomos de carbono isopentenil difosfato (IPP) y dimetilalil difosfato (DMAPP). Las plantas contienen dos vías metabólicas para la síntesis de dichos precursores metabólicos, la vía del mevalonato (MVA) (ubicada en el citosol) y la del metileritritol 4- fosfato (MEP) (ubicada en los plastos). En la actualidad, se conoce relativamente poco acerca de los mecanismos que participan en el control del flujo metabólico a través de la vía MEP y su interrelación con la vía del MVA. En el trabajo desarrollado en esta tesis se han utilizado estrategias de genética reversa para estudiar nuevos aspectos relacionados con la regulación de la biosíntesis de isoprenoides en planta modelo Arabidopsis thaliana. En particular los objetivos abordado se han centrado en el análisis fenotípico, bioquímico y molecular del mutante rif35 de Arabidopsis thaliana. Dicho mutante está afectado en la funcionalidad del gen At1g73470, que codifica para una proteína de función desconocida altamente conservada en todas las plantas y cuya sobreexpresión confiere resistencia a la fosmidomicina, un inhibidor específico de la vía del MEP. Entre los diferentes mecanismos que podrían conferir la resistencia a dicho inhibidor estaría un aumento de la actividad de la enzima diana DXR o un importe de IPP (u otro prenildifosfato) a los plastos, derivado de la vía del MVA. Es por ello que en este proyecto de tesis se ha abordado el estudio detallado de dicho mutante y la caracterización tanto del gen At1g73470 como de las proteínas correspondientes. Dentro de este contexto se han abordado los siguientes objetivos: 1) El estudio genético y fenotípico del mutante rif35 y de mutantes defectivos en el gen At1g73470, 2) La validación de las variantes de splicing descritas para el locus At1g73470 y el estudio de sus patrones de expresión en el mutante rif35 y en la variedad silvestre, 3) Estudios in silico de las proteínas correspondientes a las variantes de splicing del gen At1g73470 y análisis de su localización subcelular , y 4) La generación y caracterización de líneas transgénicas que sobreexpresan de los cDNAs correspondientes a las variantes de splicing de At1g73470.