Estudio preclínico de potenciales estrategias terapéuticas basadas en la epigenética para el cáncer de vejiga
El cáncer de vejiga (CV) representa un problema clínico importante debido a su incidencia, prevalencia, recurrencia y progresión en la recurrencia. La recurrencia representa altas tasas de mortalidad y también contribuye a la aparición de comorbilidades importantes y a los crecientes costes para los...
| Autor: | |
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| Formato: | tesis doctoral |
| Fecha de publicación: | 2019 |
| País: | España |
| Recursos: | Universidad de Alcalá (UAH) |
| Repositorio: | e_Buah Biblioteca Digital Universidad de Alcalá |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:ebuah.uah.es:10017/45408 |
| Acesso em linha: | http://hdl.handle.net/10017/45408 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palavra-chave: | Oncología Carcinogenesis Biología Molecular Medicina Medicine |
| Resumo: | El cáncer de vejiga (CV) representa un problema clínico importante debido a su incidencia, prevalencia, recurrencia y progresión en la recurrencia. La recurrencia representa altas tasas de mortalidad y también contribuye a la aparición de comorbilidades importantes y a los crecientes costes para los sistemas de salud. Aunque muchos de los eventos oncogénicos que conducen al CV son conocidos, su importancia aún está en debate. Los datos previos de nuestro grupo apuntaban hacia una implicación de la señalización dependiente de EZH2 en la recurrencia y la progresión del CV, mientras que las alteraciones frecuentes del gen PIK3CA eran predictivas de un mejor resultado clínico. En el presente trabajo, demostramos una interacción funcional entre las vías de señalización dependientes de EZH2 y PIK3CA mediante mecanismos transcripcionales y postranscripcionales. Empleando muestras clínicas y líneas celulares de CV, encontramos que las alteraciones de PI3KCA se oponen a la señalización de EZH2 a través de la inducción de dos microARNs, miR-101 y miR-138, que regulan postranscripcionalmente la expresión de EZH2 negativamente. Además, las alteraciones del gen PIK3CA facilitan la activación de AKT, que fosforila EZH2 en su residuo Ser21, evitando la actividad catalítica de EZH2 para trimetilar la histona 3 en la lisina 27 (H3K27me3). De acuerdo con estos hallazgos, el aumento de la expresión de miR-101 o miR-138 y la expresión de EZH2 fosforilada en Ser21, son factores de buen pronóstico con respecto a la recidiva y la progresión del CV. En base a los recientes descubrimientos sobre el papel de la remodelación de la cromatina en la patogénesis del CV (incluidos los procesos dependientes de EZH2), intentamos también analizar su uso como diana para la terapia del CV. Dado que observamos que la expresión aumentada de G9a, que dimetila la histona 3 en la lisina 9 (H3K9me2) y que muestra papeles cooperativos con EZH2 y DNMTs, se asocia con un resultado clínico pobre, hemos evaluado el posible efecto terapéutico de un nuevo inhibidor dual de G9a/DNMT (CM-272). Encontramos que este inhibidor indujo el arresto del ciclo celular, apoptosis y muerte celular inmunogénica en células de CV que portan el gen PIK3CA wt a través de un proceso parcialmente dependiente de la expresión o la actividad de EZH2. Además, este agente mostró sinergia in vitro e in vivo con cisplatino (CDDP), el estándar de tratamiento para los pacientes con CV avanzado. El tratamiento con CM-272 en combinación con CDDP mejora la supervivencia en un modelo de ratón inmunocompetente de CV metastásico agresivo. Este modelo ha sido generado por la ablación específica de los genes supresores de tumores Rb1, Pten y TrP53 en las células uroteliales basales de la vejiga de ratones nulos para Rbl1. Las características histológicas y moleculares de los tumores desarrollados en el modelo de ratón se asemejan al subtipo molecular basal-escamoso del CV humano. El tratamiento combinado de los ratones transgénicos con CM-272 y CDDP ha dado como resultado una regresión significativa del tumor y la metástasis, sin efectos importantes en las principales vías oncogénicas como ERK, AKT o STAT3, que están activas permanentemente en el modelo. Basados en los análisis transcripcionales e in silico, descubrimos un proceso novedoso en el cual el inhibidor indujo una respuesta retroviral endógena que condujo a la señalización de interferón γ y a la inducción de la activación de ligandos de células NK en células tumorales. Esto produce la infiltración inmune de tumores y metástasis y la reducción de tumores y metástasis mediadas por células inmunitarias, lo que representa una nueva y potencial vía en el manejo del CV avanzado. Cabe señalar que también observamos que la ausencia de respuesta clínica en una serie de pacientes con cáncer urotelial avanzado tratados con un inhibidor de PD-1 como primera línea, se asocia con niveles elevados de G9a, EZH2 y sus respectivas marcas de metilación H3K9me2 y H3K27me3. Estas observaciones indican que la expresión de G9a y/o EZH2 podrían ser candidatos a biomarcadores de respuesta a la inmunoterapia y su inhibición puede aumentar la eficacia de las terapias basadas en la inhibición de puntos de control inmunitarios. En resumen, nuestros resultados ponen de manifiesto aquellos procesos moleculares que resultan clave para la progresión del CV y que deben considerarse en el tratamiento de pacientes y en el diseño de nuevos enfoques terapéuticos dirigidos. Además, estos hallazgos respaldan nuevas y prometedoras oportunidades para la terapia epigenética en pacientes con CV. |
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