Activación de espermatozoides de mamífero con el ionóforo de calcio A23187
[ES] Los espermatozoides de mamíferos adquieren la capacidad fecundante en el tracto femenino en un proceso llamado capacitación. Sin embargo de los millones de espermatozoides que se producen y eyaculan solo una fracción muy pequeña, estimada en torno al 10%, adquiere este estadio capacitado en un...
| Author: | |
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| Format: | master thesis |
| Publication Date: | 2018 |
| Country: | España |
| Institution: | Universitat Politècnica de València (UPV) |
| Repository: | RiuNet. Repositorio Institucional de la Universitat Politécnica de Valéncia |
| Language: | Spanish |
| OAI Identifier: | oai:riunet.upv.es:10251/106825 |
| Online Access: | https://riunet.upv.es/handle/10251/106825 |
| Access Level: | Open access |
| Keyword: | Espermatozoides Spermatozoa Capacitación Reproducción asistida Capacitation Assisted reproduction PRODUCCION ANIMAL Máster Universitario en Mejora Genética Animal y Biotecnología de la Reproducción-Màster Universitari en Millora Genètica Animal i Biotecnologia de la Reproducció |
| Summary: | [ES] Los espermatozoides de mamíferos adquieren la capacidad fecundante en el tracto femenino en un proceso llamado capacitación. Sin embargo de los millones de espermatozoides que se producen y eyaculan solo una fracción muy pequeña, estimada en torno al 10%, adquiere este estadio capacitado en un momento dado. Nuestra hipótesis es que es posible activar otras subpoblaciones no capacitadas para que adquieran la habilidad de fecundar mediante la inducción de procesos relacionados con la capacitación. A nivel molecular, uno de estos procesos es el aumento del calcio intracelular. Por esta razón, los ionóforos de Ca2+, como el A23187, son comúnmente usados como inductores de capacitación espermática al provocar la entrada de calcio al citoplasma del espermatozoide y producir cambios equiparables a la capacitación, como por ejemplo la inducción de un tipo de motilidad vigoroso conocido como hiperactivación. El objetivo del presente trabajo fue conseguir la activación de poblaciones espermáticas no capacitadas mediante la utilización del ionóforo de Ca2+ A23187 (a partir de ahora solo se denominará como ionóforo) tanto en ratón como en toro. En espermatozoides de ratón observamos que el tratamiento con concentraciones de 5 y 10 µM de ionóforo provocó hiperactivación e inducción de la reacción acrosómica a un mismo nivel alcanzando saturación en ambas respuestas. Además, utilizando una concentración subóptima de espermatozoides para realizar la fecundación in vitro, el tratamiento con 5 µM de ionóforo aumentó la tasa de fecundación de un 49% obtenida en el control a un 68% (P<0,05 de acuerdo con ANOVA). Sin embargo el tratamiento con 10 µM provocó un ligero descenso en la tasa de fecundación con respecto al control indicando cierto nivel de toxicidad a esta concentración. En espermatozoides de toro observamos una tasa de reacción acrosómica elevada en la muestra control (76%). Esto se debió a que utilizamos muestras criopreservadas y el mismo proceso de congelación/descongelación induce la reacción acrosómica. El tratamiento con ionóforo no aumento esta tasa de reacción acrosómica posiblemente porque todos los espermatozoides susceptibles ya estaban reaccionados por el propio proceso de congelación/descongelación. Tampoco encontramos efecto alguno del tratamiento con ionóforo sobre la capacidad fecundante de estos espermatozoides de toro. Los resultados indican que en ratón existe una subpoblación sensible a la activación por el ionóforo que se hiperactiva, pierde su acrosoma y es capaz de fecundar en condiciones in vitro. Sin embargo en toro pensamos que el proceso de criopreservación seminal ya ha activado esta subpoblación haciéndola insensible al ionóforo. |
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