Optimización de un modelo experimental de infección in vitro con Porphyromonas gingivalis W83 y macrófagos M1 para análisis s genómicos y transcriptómicos
Objetivo: El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de la infección in vitro de macrófagos humanos con Porphyromonas gingivalis W83, caracterizando tanto la interacción huésped-patógeno como los mecanismos asociados a la respuesta inmune innata frente a esta cepa virulenta. Materiales y Mé...
| Autor: | |
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| Formato: | tesis doctoral |
| Fecha de publicación: | 2026 |
| País: | España |
| Recursos: | Universidad Complutense de Madrid (UCM) |
| Repositorio: | Docta Complutense |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:docta.ucm.es:20.500.14352/133473 |
| Acesso em linha: | https://hdl.handle.net/20.500.14352/133473 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palavra-chave: | 616.314.17-008.1(043.2) Enfermedad periodontal Periodontal Disease Periodoncia 32 Ciencias Médicas |
| Resumo: | Objetivo: El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de la infección in vitro de macrófagos humanos con Porphyromonas gingivalis W83, caracterizando tanto la interacción huésped-patógeno como los mecanismos asociados a la respuesta inmune innata frente a esta cepa virulenta. Materiales y Métodos: Se evaluó la cinética de proliferación de P. gingivalis W83 mediante la generación de una curva de crecimiento utilizando unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC/mL) y densidad óptica (DO). Adicionalmente, se construyó una curva estándar para la cuantificación del ADN bacteriano mediante reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (PCRc). Los monocitosTHP-1 se diferencian a macrófagos mediante incubación con acetato de forbol miristato (PMA)durante 48 horas, seguidas de un reposo de 24 horas, y posteriormente se polarizaron hacia el fenotipo M1 mediante estimulación con interferón gamma (IFN-γ) y lipopolisacárido (LPS). La polarización hacia M1 fue validada mediante la cuantificación de citoquinas proinflamatorias clave (interleuquina-1 beta, IL-1β; factor de necrosis tumoral alfa, TNF-α; e interleuquina-6, IL-6) utilizando la metodología Luminex®. Finalmente, los macrófagos M1 fueron infectados con P. gingivalis en fase exponencial, y se cuantificó el ADN bacteriano presente en sobrenadantes y macrófagos lisados tras una hora de infección mediante PCRc.. |
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