Clonación, expresión, caracterización y modelado de esterasas putativas de Corynebacterium glutamicum ATTC 13032

El objetivo de este trabajo fue clonar, expresar, purificar y caracterizar algunos genes de Corynebacterium glutamicum ATCC13032, identificados como enzimas de la superfamilia de las esterasas/lipasas. De todos los genes clonados, solo se pudo estudiar la proteína codificada por el gen Cg2528. Se pu...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Navarro-González, Inmaculada
Tipo de recurso: artículo
Fecha de publicación:2012
País:España
Institución:Universidad de Murcia
Repositorio:DIGITUM. Depósito Digital Institucional de la Universidad de Murcia
OAI Identifier:oai:digitum.um.es:10201/29634
Acceso en línea:http://dx.doi.org/10.6018/analesbio.0.34.12
http://hdl.handle.net/10201/29634
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Clonación
Esterasas
Cloning
Esterase
57 - Biología
Descripción
Sumario:El objetivo de este trabajo fue clonar, expresar, purificar y caracterizar algunos genes de Corynebacterium glutamicum ATCC13032, identificados como enzimas de la superfamilia de las esterasas/lipasas. De todos los genes clonados, solo se pudo estudiar la proteína codificada por el gen Cg2528. Se purificó y caracterizó la proteína. Su máxima actividad la presentó 40 ºC y a pH 8. Presentó una gran estabilidad en presencia de disolventes orgánicos como el DMSO y el metanol. Con respecto al análisis cinético, presentó una mayor actividad sobre los p-nitrofenil ésteres y los naftilos que sobre el S-methiltiobutanoato. Se dilucidó la triada catalítica alineando la secuencia de aminoácidos. La estructura tridimensional se predijo usando la esterasa (2OGS) de Geobacillus stearothermophilus como molde.