Caracterització funcional d'elements conservats de la via Wnt en la regeneració cefàlica de planàries
La comunicación entre células es esencial para integrar las órdenes necesarias para que un organismo pueda desarrollarse correctamente desde el estadio de una célula hasta el mantenimiento del estado adulto. El número de vías de señalización que las células necesitan para comunicarse es relativament...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2005 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/1869 |
| Acceso en línea: | http://www.tdx.cat/TDX-1109105-123759 http://hdl.handle.net/10803/1869 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Via Wnt Comunicació intercel·lular Planàries Regeneració de proteïnes Ciències Experimentals i Matemàtiques 575 |
| Sumario: | La comunicación entre células es esencial para integrar las órdenes necesarias para que un organismo pueda desarrollarse correctamente desde el estadio de una célula hasta el mantenimiento del estado adulto. El número de vías de señalización que las células necesitan para comunicarse es relativamente bajo y por ello dichas vías se reutilizan varias veces durante el desarrollo de los organismos. El organismo modelo empleado en este trabajo es la planaria de agua dulce <I>Girardia tigrina</I>. Las planarias son especialmente interesantes por su gran plasticidad morfológica y gran habilidad para regenerar las partes perdidas del cuerpo. Con esta tesis se intenta dilucidar el papel en la regeneración de una vía de proteínas señalizadoras en particular, la vía Wnt, que rige múltiples funciones durante el desarrollo normal de los organismos. En concreto se describe el aislamiento de un homólogo de la subfamilia Wnt-5, del regulador negativo de la vía, la GSK-3 (glicógeno sintasa quinasa-3), y de uno de los efectores nucleares de la familia TCF (T-cell factor). Asímismo se analiza el patrón de expresión de los dos primeros, hallándose un máximo en el sistema nervioso central. Además, se detallan experimentos de RNA de interferencia realizados por distintas metodologías para provocar fenotipos de pérdida de función. Estas metodologías consistieron por un lado en la inyección de RNA de doble cadena diseñado a partir del gen que específicamente se pretendía bloquear y, por otro lado, en la ingestión de bacterias que expresaban la doble cadena de RNA del gen en cuestión. Dichas aproximaciones fueron exitosas para el gen GSK-3, con resultados corroborados con drogas inhibidoras para dicha quinasa. Para el ligando Wnt-5 no se obtuvo fenotipo de falta de función, hipotetizándose así una posible redundancia entre posibles distintos Wnt existentes en planaria. Los fenotipos de pérdida de función de GSK-3, en cambio, indican un papel esencial para este gen en la regeneración de la parte más anterior del organismo y en la determinación cefálica. |
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