Actividad antimicrobiana de ácidos grasos Omega 3 frente a bacterias patógenas orales en un modelo subgingival multiespecie validado de biofilm in vitro
Antecedentes y Objetivos: Investigaciones previas han demostrado la capacidad antimicrobiana de los extractos de ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) n-3 de cadena larga frente a varios patógenos periodontales en estado planctónico. Sin embargo, la mayor parte de las bacterias en la naturaleza, y p...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Fecha de publicación: | 2019 |
| País: | España |
| Institución: | Universidad Complutense de Madrid (UCM) |
| Repositorio: | Docta Complutense |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:docta.ucm.es:20.500.14352/14345 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/20.500.14352/14345 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | 616.31 Boca-Enfermedades Boca-Bacteriología Mouth-Diseases Mouth-bacteriology Periodoncia 3213.13 Ortodoncia-Estomatología |
| Sumario: | Antecedentes y Objetivos: Investigaciones previas han demostrado la capacidad antimicrobiana de los extractos de ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) n-3 de cadena larga frente a varios patógenos periodontales en estado planctónico. Sin embargo, la mayor parte de las bacterias en la naturaleza, y por ende en la cavidad oral, se encuentran organizadas en biofilms. No obstante, la literatura existente sobre el efecto de estos extractos en los patógenos periodontales organizados en modelos de biofilm in vitro es todavía escasa, o se trata de modelos de biofilms mono-especie. Por esta razón, el objetivo de este estudio es analizar de manera independiente la capacidad antibacteriana de dos extractos de ácidos grasos n-3 de cadena larga: ácido docosahexaenoico (DHA) y ácido eicosapentaenoico (EPA), en un modelo validado de biofilm multi-especie formado in vitro, constituido por Streptococcus oralis, Actinomyces naeslundii, Veillonela parvula y los patógenos periodontales Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis y Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Material y Métodos: Teniendo en cuenta las MBCs y las MICs observadas de las seis especies bacterianas implicadas, se utilizó un modelo validado de biofilm multi-especie in vitro, para evaluar la capacidad antibacteriana de los extractos de EPA y DHA (100 µM), frente a las especies bacterianas organizadas en biofilm, tras 60 segundos de exposición. Para ello, se realizó el recuento de las bacterias -expresadas como unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC/mL)- mediante la técnica reacción cuantitativa en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR, por sus siglas en inglés). Además, la vitalidad celular de los biofilms fue analizadas por microscopía de barrido laser confocal (CLSM, por sus siglas en inglés). Con relación al análisis estadístico, la variable dependiente seleccionada -para valorar el efecto antibacteriana de DHA y EPA de manera independiente- fue el número de UFC/mL viables presentes en el biofilm. Para contrastar la normalidad de la distribución de los datos estos fueron sometidos al test de Shapiro-Wilk. El efecto de cada extracto (variables independientes) y su interacción con las variables dependientes, se evaluó mediante el test paramétrico ANOVA y las correcciones de Bonferroni para comparaciones múltiples. Los datos se expresaron como medias ± desviación estándar y como el porcentaje medio de inhibición. Los resultados se consideraron estadísticamente significativos con p<0,05. Resultados: Con respecto a la capacidad antibacteriana, los extractos de DHA y EPA (100 µM) provocaron reducciones estadísticamente significativas en las UFC/mL viables de todas las bacterias en el modelo de biofilm in vitro S. oralis, A. naeslundii, V. parvula, F. nucleatum, P. gingivalis y A. actinomycetemcomitans- tras 60 segundos de exposición. Alcanzándose reducciones de hasta tres órdenes de magnitud con respecto al control negativo (PBS) en el caso de DHA y de dos (A. naeslundii, F. nucleatum, P. gingivalis) o uno (S. oralis, V. parvula, A. actinomycetemcomitans) en el caso de EPA. Conclusiones: Los extractos de EPA y DHA presentan capacidad antimicrobiana frente a seis especies bacterianas (S. oralis, A. naeslundii, V. parvula, y los patógenos periodontales F. nucleatum, P. gingivalis y A. actinomycetemcomitans y) organizadas en biofilm, de manera significativa frente a todas ellas. |
|---|