Estudio fenotípico y molecular de Malassezia pachydermatis y Malassezia furfur aisladas de animales
El género Malassezia está formado por levaduras lipófilas, las cuales son consideradas parte de la microbiota normal de varios animales, incluida la especie humana. En determinadas condiciones, la población de estas levaduras puede proliferar en exceso y causar enfermedades dérmicas y otitis. En per...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Fecha de publicación: | 2017 |
| País: | España |
| Institución: | Universitat Autònoma de Barcelona |
| Repositorio: | Dipòsit Digital de Documents de la UAB |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:ddd.uab.cat:187227 |
| Acceso en línea: | https://ddd.uab.cat/record/187227 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Malassezia pachydermatis Malassezia furfur Animals Animales |
| Sumario: | El género Malassezia está formado por levaduras lipófilas, las cuales son consideradas parte de la microbiota normal de varios animales, incluida la especie humana. En determinadas condiciones, la población de estas levaduras puede proliferar en exceso y causar enfermedades dérmicas y otitis. En perros, la especie más frecuentemente aislada es Malassezia pachydermatis, en la que se ha reconocido una importante variabilidad intraespecífica. La variabilidad dentro de esta especie se estudió mediante métodos moleculares y fenotípicos. Por una parte, se seleccionaron cepas representativas aisladas de distintos animales domésticos y se secuenciaron dos regiones ribosomales y los genes -tubulina y quitín sintasa 2. El estudio de las secuencias obtenidas permitió describir nuevos genotipos. Además, se realizó un estudio filogenético multilocus, en el que se apreció una asociación de algunos genotipos de M. pachydermatis con ciertas especies animales. Los resultados sugirieron que M. pachydermatis está sufriendo un proceso de diferenciación, en el cual las levaduras se estarían adaptando a distintos huéspedes animales. Por otro lado, se estudió la diversidad intraespecífica en M. pachydermatis con métodos fenotípicos. Se emplearon las técnicas clásicamente utilizadas para el estudio de estas levaduras, incluyendo las pruebas fisiológicas de crecimiento a distintas temperaturas de incubación, la actividad catalasa y -glucosidasa y el test de difusión de Tweens y Cremophor EL. Paralelamente, se realizó una modificación del test de difusión mediante el uso de un medio sintético sin lípidos. Usando esta modificación, se obtuvo una mayor eficacia y reproducibilidad en los resultados. Se observó una notable variabilidad intraespecífica dentro de esta especie y se confirmó su naturaleza lipodependiente. Debido a la condición de patógeno oportunista de M. pachydermatis, se diseñó y validó una técnica de PCR a tiempo real para detectar y cuantificar estas levaduras a partir de muestras del conducto auditivo externo de perros. Aplicando esta técnica, se observaron diferencias cuantitativas en la población de M. pachydermatis en perros sanos y en aquellos con otitis externa. Finalmente, se ha estudiado la variabilidad intraespecífica de Malassezia furfur en cepas de animales. Esta especie clásicamente se ha asociado a humanos, aunque recientemente se ha detectado en varias especies de animales. Para este estudio se seleccionaron cepas de M. furfur aisladas de distintos animales domésticos y aves salvajes en cautividad. Por una parte, se realizó un estudio filogenético secuenciando y analizando dos regiones ribosomales y el gen de -tubulina. Este estudio reveló una notable variedad intraespecífica, que podría corresponder a la adaptación de las cepas a distintas especies animales. Por otro lado, se analizaron las mismas cepas con métodos fenotípicos, juntamente con la modificación del test de difusión de Tweens y Cremophor EL. Mediante este estudio, se ha demostrado una importante diversidad fenotípica, a la vez que la modificación del test de difusión de Tweens y Cremophor EL permitió observar mayores diferencias entre las cepas que con la metodología clásica. Además, se ha constatado la presencia de M. furfur en especies animales de las cuales se desconocía. |
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