Bases per a la formulació de l'agent de biocontrol Candida sake CPA-1
El desenvolupament de resistència als fungicides per part de molts patógens en<br/>postcollita de fruites i vegetals, conjuntament amb una preocupació creixent de la<br/>societat respecte als perills sanitaris i mediambientals que comporten els pesticides i els<br/>seus residus, ha...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2000 |
| País: | España |
| Institución: | Universitat de Lleida (UdL) |
| Repositorio: | Repositori Obert UdL |
| OAI Identifier: | oai:repositori.udl.cat:10459.1/63895 |
| Acceso en línea: | http://www.tdx.cat/TDX-1201109-173959 http://hdl.handle.net/10803/8391 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | malalties i plagues fruita bioquímica Tecnologia d'Aliments 631 633 |
| Sumario: | El desenvolupament de resistència als fungicides per part de molts patógens en<br/>postcollita de fruites i vegetals, conjuntament amb una preocupació creixent de la<br/>societat respecte als perills sanitaris i mediambientals que comporten els pesticides i els<br/>seus residus, han generat un gran interès pel desenvolupament de mètodes alternatius<br/>als productes químics de síntesi. El control biològic mitjançant la utilització de<br/>microorganismes antagònics s'ha presentat com una de les alternatives més<br/>prometedores al control químic. L'esforç que la investigació dedica a aquesta àrea ha<br/>incrementat d'una manera espectacular, i així s'està començant a reflexar en el nombre<br/>d'agents de biocontrol disponibles en el mercat o en fase de recerca. Entre ells destaca<br/>la soca CPA-1 del llevat Candida sake, aillada de la superfície de pomes en el<br/>laboratori de Patologia del Centre UdL-IRTA. Aquesta soca ha demostrat tenir una<br/>bona capacitat antagònica enfront els principals fongs patògens en postcollita de fruita<br/>de llavor. Fins al moment, C. sake ha estat patentada a Espanya i cinc països més. No<br/>obstant, cara a la comercialització d'aquest biofungicida és necessari obtenir una<br/>formulació, que permeti una presentació adequada del producte, amb una alta viabilitat<br/>i estabilitat en el temps i que faciliti la seva distribució i aplicació mitjançant les<br/>técniques ja existents. Ademes, aquesta formulació ha de tenir una efectivitat<br/>comparable a les cèl·lules fresques.<br/>L'objectiu de la present tesi ha estat l'estudi de les bases per a la formulació d'aquest<br/>agent de biocontrol. En primer lloc, es va estudiar la possibilitat de deshidratar aquest<br/>agent mitjançant la liofilització, avaluant els diferents factors que poden contribuir a<br/>incrementar la viabilitat, com el mètode de congelació i l'addició de substàncies<br/>protectores (Capítol 3), i el medi utilitzat en la rehidratació de les cèl·lules liofilitzades<br/>(Capítol 4). També es va avaluar l'efectivitat de les cél·lules liofilitzades contra<br/>Pínicillium expansion en pomes "Golden Delicious" i la seva estabilitat en condicions<br/>d'emmagatzematge (Capítol 4). Ja que la manipulació fisiològica de les condicions de<br/>creixement pot afectar significativament la qualitat de les cél·lules i la seva<br/>competència ecològica, es van dur a terme estudis per avaluar l'efecte que té la<br/>modificació de l'activitat aigua (ow) d'un medi de cultiu a base de melassa de sucre de<br/>canya en el potencial hídric de les cèl·lules (Capítol 5), en el creixement de C. sake, en<br/>l'acumulació de reserves endígenes i en la resistència a l'estrés hídric (Capítol 6).<br/>Finalment, basant-nos en aquests resultats, es va estudiar per primer cop la possibilitat<br/>de conservar les cèl·lules de C. sake en solucions líquides isotòniques (Capítol 7).<br/>Les cèl·lules de C. sake es van mostrar molt sensibles al procés de liofilització. La llet<br/>en pols desnatada, utilitzada al 10%, va presentar-se com un bon protector i va donar<br/>un producte sec porós i fàcilment rehidratable. Amb la utilització d'una solució protectora que contenia el 10% de llet en pols i el 10% de lactosa, es va aconseguir<br/>augmentar la viabilitat de les cèl·lules fins el 40%. El medi de rehidratació també es va<br/>presentar com un factor important per a la reactivado del llevat. Així, utilitzant el 10%<br/>de llet en pols com a medi de rehidratació enlloc de la solució amortidora de fosfat, la<br/>viabilitat va augmentar del 40 al 85%. Les cèl·lules liofòlitzades van reduir el<br/>percentatge de podridures causades per P. expansion en pomes "Golden Delicious". No<br/>obstant, la seva efectivitat va ser menor que la de les cél·lules fresques. La viabilitat del<br/>producte liofòlitzat va disminuir fins el 10% després de 2 mesos de conservació a 4C.<br/>El potencial hídric de les cèl·lules crescudes en el medi a base de melassa amb aw<br/>modificada i sense modificar, va disminuir en disminuir l'aw del medi de cultiu.<br/>Ademes, aquesta modificació de l'aw del medi de cultiu va provocar un canvi en les<br/>reserves endògenes de les cèl·lules de C. sake, sense afectar significativament el seu<br/>creixement quan l'aw del medi va ser de 0,98. Les cèl·lules crescudes durant 48 h en el<br/>medi de melassa no modificat i els modificats a aw de 0,98 mitjançant l'addició de<br/>glicerol o NaCl, van presentar gran resistència a l'estrés hídric. Els principals soluts<br/>acumulats en les cèl·lules de C. sake quan Vaw del medi de cultiu es va reduir van ser el<br/>glicerol i l'arabitol.<br/>El medi de cultiu, el solut utilitzat per a disminuir el potencial hídric de les solucions<br/>líquides i la temperatura de conservació, van influir en la viabilitat de C. sake<br/>conservada en medi líquid, essent el medi de melassa no modificat i els modificats a aw<br/>0,98 amb glicerol o sorbitol els millors. S'ha aconseguit una formulació isotònica que<br/>després de 7 mesos de conservació a 4C manté la seva viabilitat, i efectivitat contra<br/>P. expansion en pomes "Golden Delicious". Aquesta formulació es va preparar fent<br/>crèixer les cèl·lules en el medi de melassa modificat amb sorbitol (aw 0,98) i<br/>conservant-les amb una solució isotònica de trealosa. |
|---|