Generació de cèl·lules estrellades derivades de iPSCs i la seva utilització com a model per l'estudi de la fibrosi hepàtica
[cat] La tesi doctoral es centra en la generació i caracterització de les cèl·lules estrellades hepàtiques derivades de cèl·lules mare pluripotents induïdes (iPSCs), anomenades com iPSC-HSCs, pel modelatge in vitro de les malalties hepàtiques i cribratge de fàrmacs anti-fibrogènics. Les iPSC- HSCs s...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2021 |
| País: | España |
| Institución: | Universidad de Barcelona |
| Repositorio: | Dipòsit Digital de la UB |
| OAI Identifier: | oai:diposit.ub.edu:2445/185304 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/2445/185304 http://hdl.handle.net/10803/674165 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Malalties del fetge Cèl·lules mare Cultiu de teixits Genètica mèdica Liver diseases Stem cells Tissue culture Medical genetics |
| Sumario: | [cat] La tesi doctoral es centra en la generació i caracterització de les cèl·lules estrellades hepàtiques derivades de cèl·lules mare pluripotents induïdes (iPSCs), anomenades com iPSC-HSCs, pel modelatge in vitro de les malalties hepàtiques i cribratge de fàrmacs anti-fibrogènics. Les iPSC- HSCs són similars a les HSCs primàries a nivell fenotípic, funcional i transcriptòmic, i es poden expandir, criopreservar i co-cultivar amb altres tipus cel·lulars hepàtics demostrant el seu potencial com a nova font de HSCs per realitzar assaigs in vitro. A més, en aquesta tesi doctoral es va determinar que el protocol de diferenciació de les HSCs basat en l'exposició de factors de creixement durant 12 dies, induïa la diferenciació de les iPSCs a una varietat de cèl·lules intermèdies amb característiques proliferatives i mesotelials que finalment donaven lloc a subpoblacions de cèl·lules HSCs. Aquest protocol podria estar mimetitzant el desenvolupament embrionari de les HSCs descrit en models animals. A punt final de la diferenciació, s'obtenen diferents poblacions de HSCs que podrien estar indicant l'heterogeneïtat de les HSCs ja prèviament observada en estudis en models animals i mostres de pacients. Per tant, ajustant el nostre protocol de diferenciació permetria generar HSCs en diferents perfils genètics presents en la fisiologia i fisiopatologia hepàtica. El fet de d’obtenir cèl·lules diferenciades a partir de iPSCs permet establir sistemes de cultius cel·lulars personalitzats, ja que les iPSCs es poden obtenir de pacients específics i a més es poden modificar genèticament generant cèl·lules amb mutacions o polimorfismes associats a malalties hepàtiques. Per aquest motiu, en aquesta tesi doctoral hem generat una línia de iPSCs amb la sobreexpressió d'una variant genètica del gen Hidroxiesteroid 17-Beta Deshidrogenasa 13 (HSD17B13) que té un efecte protector en la progressió de la malaltia de fetge gras no alcohòlica. Les iPSCs es van modificar amb la inserció de la variant del gen HSD17B13 i posteriorment es van diferenciar a hepatòcits i HSCs. Els hepatòcits que presenten la sobreexpressió de HSD17B13 presentaven menys dany hepatocitari que els hepatòcits controls al tractar-se amb medi lipotòxic i per tant, les cèl·lules amb la variant genètica mimetitzen l’efecte protector descrit en la fisiopatologia hepàtica. Així doncs, les iPSCs permeten generar cèl·lules hepàtiques amb o sense polimorfismes per modelar malalties hepàtiques in vitro. |
|---|