Dinámica de la topología del DNA durante la replicación
Comprender cómo replica el DNA es una cuestión crítica para entender la vida.La replicación del DNA es un proceso muy complejo y altamente regulado, en el queestán implicadas una gran cantidad de moléculas. Hoy por hoy, este proceso no estáplenamente caracterizado. En la presente Tesis Doctoral se h...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Fecha de publicación: | 2018 |
| País: | España |
| Institución: | Universidad Complutense de Madrid (UCM) |
| Repositorio: | Docta Complutense |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:docta.ucm.es:20.500.14352/16191 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/20.500.14352/16191 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | 577.21(043.2) ADN DNA Biología molecular (Biología) Genética 2415 Biología Molecular 2409 Genética |
| Sumario: | Comprender cómo replica el DNA es una cuestión crítica para entender la vida.La replicación del DNA es un proceso muy complejo y altamente regulado, en el queestán implicadas una gran cantidad de moléculas. Hoy por hoy, este proceso no estáplenamente caracterizado. En la presente Tesis Doctoral se ha intentado profundizar enla comprensión de la replicación del DNA utilizando diferentes aproximaciones a lo largode sus distintas etapas.Actualmente no existe un consenso entre los miembros de la comunidad científicaacerca de si las horquillas replicativas pueden girar libremente in vivo durante lareplicación con la consecuente formación de pre-encadenados. En una primera fase de lapresente Tesis Doctoral se aportó información acerca de esta cuestión, tratando decontestar a la pregunta de si las horquillas pueden girar durante la replicación. Para ellose analizó la topología de tres plásmidos bacterianos derivados de pBR322 que conteníanla secuencia para la terminación TerE clonada a distintas distancias del origen dereplicación. Con estos plásmidos se transformaron dos estirpes distintas de E. coli, unaproficiente y otra deficiente en la Topoisomerasa IV (Topo IV). Se aislaronintermediarios de replicación (RIs) que se analizaron mediante electroforesisbidimensional en geles de agarosa. Los resultados obtenidos indican que los RIs aisladosde las células con la Topo IV inactiva presentan un nivel de torsión mayor que los aisladosde la estirpe con la Topo IV activa. Esta observación sugiere que las horquillas puedengirar libremente in vivo a medida que avanza la replicación... |
|---|