Parametrización de la regulación transcripcional en bacterias : TetR como paradigma
RESUMEN:Para comprender en profundidad la regulación transcripcional, necesitamos determinar no solo los mecanismos moleculares que intervienen, sino también cuantificar las relaciones entre los factores de transcripción (TF) y sus promotores diana, es decir, su función de transferencia. Estudios us...
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| Formato: | tesis doctoral |
| Fecha de publicación: | 2016 |
| País: | España |
| Recursos: | Universidad de Cantabria (UC) |
| Repositorio: | UCrea Repositorio Abierto de la Universidad de Cantabria |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.unican.es:10902/8419 |
| Acesso em linha: | http://hdl.handle.net/10902/8419 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palavra-chave: | Regulación transcripcional Función de transferencia Fluorimetría Microscopía de epifluorescencia TetR PtetA Transcriptional regulation Transfer function Fluorimetry Epifluorescence microscopy |
| Resumo: | RESUMEN:Para comprender en profundidad la regulación transcripcional, necesitamos determinar no solo los mecanismos moleculares que intervienen, sino también cuantificar las relaciones entre los factores de transcripción (TF) y sus promotores diana, es decir, su función de transferencia. Estudios usando reporteros fluorescentes demuestran que la dinámica y la intensidad de algunos reguladores pueden cuantificarse in vivo, aunque sólo en condiciones específicas (Rosenfeld, 2005; Fernandez-Lopez, 2010). Sin embargo, aplicando la desigualdad de Jensen (Jensen, 1906), la inherente no linealidad de las relaciones regulador/promotor dicta que, la relación entre el comportamiento medio de la población y el comportamiento de las células individuales no es directa. En esta tesis se exploraron diferentes metodologías para determinar la función de transferencia de un regulador y su promotor diana, utilizando como ejemplo el sistema de regulación del operón de resistencia antibiótica a la tetraciclina del transposón Tn10. Se realizaron mediciones en cultivo mediante fluorímetro y mediciones en célula única mediante microscopía de epifluorescencia. Los datos permitieron la determinación de la función de transferencia. Además, la microscopía permitió obtener las distribuciones poblacionales, corroborando la desigualdad de Jensen en la actividad transcripcional. |
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