Efecto de la sobreexpresión de BCL-XL en la función y supervivencia de la célula β pancreática
La diabetes es una enfermedad crónica, con una alta tasa de mortalidad y morbilidad, que afecta a 463 millones de personas a nivel mundial, aunque la Federación Internacional de Diabetes estima que habrá 700 millones de casos en 2045. Los esfuerzos para ralentizar o frenar el transcurso de la diabet...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Fecha de publicación: | 2020 |
| País: | España |
| Institución: | Universidad Miguel Hernández de Elche |
| Repositorio: | REDIUMH. Depósito Digital de la UMH |
| OAI Identifier: | oai:dspace.umh.es:11000/25721 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/11000/25721 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | BCL-XL Sobreexpresión Célula β Supervivencia Función CDU::5 - Ciencias puras y naturales::57 - Biología |
| Sumario: | La diabetes es una enfermedad crónica, con una alta tasa de mortalidad y morbilidad, que afecta a 463 millones de personas a nivel mundial, aunque la Federación Internacional de Diabetes estima que habrá 700 millones de casos en 2045. Los esfuerzos para ralentizar o frenar el transcurso de la diabetes se han centrado en limitar la respuesta inmune en la diabetes tipo 1 y reducir la insulinorresistencia en la diabetes tipo 2 , pero los avances logrados no son suficientes para mantener una masa de célula β funcional capaz de mantener la normoglucemia. Durante el transcurso de la diabetes tipo 1 y diabetes tipo 2, las células β pancreáticas están expuestas a diferentes estímulos apoptóticos, que acaban provocando su disfunción y/o muerte, y la consecuente hiperglucemia. Estudios previos demuestran que la mayor resistencia de la célula α pancreática a la apoptosis en condiciones de diabetes tipo 2 se debe, en parte, a su alta expresión de la proteína antiapoptótica BCL-XL en comparación a su expresión en la célula β. En este trabajo se postula que la sobreexpresión de BCL-XL en la célula β pancreática puede tener un efecto protector frente a la apoptosis en las condiciones observadas en la diabetes tipo 1 y diabetes tipo 2. Para estudiar los efectos de la sobreexpresión de BCL-XL en la célula β, se sobreexpresó esta proteína mediante un vector adenoviral en dos líneas de célula β: INS-1E (de rata) y EndoC-βH1 (humana) logrando un aumento de 7 veces (INS-1E) y 5 veces (EndoC-βH1) sobre su respectiva expresión endógena. Se comprobó la sobreexpresión mediante inmunocitofluorescencia y análisis Western Blot. Se analizó el efecto de la sobreexpresión de BCL-XL en la función de la célula β mediante el análisis de las oscilaciones de Ca2+ intracelular y la secreción de insulina en respuesta a diferentes estímulos por microscopía de fluorescencia y ELISA, respectivamente. El efecto en la viabilidad celular se evaluó mediante tinción con Hoechst/PI. Las células se trataron en presencia de un estímulo proapoptótico de la diabetes tipo 1 (un cóctel de citoquinas proinflamatorias) o un estímulo de la diabetes tipo 2 (palmitato). Los resultados indican que la sobreexpresión de BCL-XL reduce levemente la señal de Ca2+ intracelular y la función secretora de insulina en INS-1E, pero no afecta a la función secretora del modelo humano. La sobreexpresión de BCL-XL fue capaz de proteger un 40 % a INS-1E y un 99% a EndoC-βH1 frente a la apoptosis inducida por citoquinas, y un 73% frente a la inducida por palmitato en EndoC-βH1. Los resultados de este trabajo indican que la sobreexpresión de BCL-XL no parece alterar la función secretora de la célula β humana. Además, la sobreexpresión de BCL-XL es capaz de proteger a la célula β en el microambiente proapoptótico de la diabetes tipo 1 y diabetes tipo 2.Los resultados expuestos en este trabajo abren la puerta a la búsqueda de otras estrategias de terapia génica en células β humanas que mejoren su viabilidad en diabetes. |
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