Estudio de la nicotinamida/nicotinato mononucleótido adenililtransferasa de giardia lamblia (gnmnat): determinación de la localización subcelular y aproximación estructural
Giardia lamblia es un organismo divergente, causante de una enfermedad denominada Giardiasis. Este parásito reviste especial interés biológico por su posición evolutiva basal y metabolismo simplificado; por esta razón es importante estudiar el metabolismo del NAD+ en este organismo y así conocer sus...
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión aceptada para publicación |
| Fecha de publicación: | 2013 |
| País: | Colombia |
| Institución: | Universidad Nacional de Colombia |
| Repositorio: | Repositorio UN |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.unal.edu.co:unal/60028 |
| Acceso en línea: | https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/60028 http://bdigital.unal.edu.co/57937/ |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | 5 Ciencias naturales y matemáticas / Science 54 Química y ciencias afines / Chemistry Giardia lamblia Dinucleótido de Adenina y Nicotinamida (NAD+) Nicotinamida/Nicotinato Mononucleotido Adenililtransferasa (NMNAT) anticuerpos Nicotinamide Adenine Dinucleotide (NAD+)(NMNAT), Nicotinamide/Nicotinate Mononucleotide Adenylyltransferasa antibodies |
| Sumario: | Giardia lamblia es un organismo divergente, causante de una enfermedad denominada Giardiasis. Este parásito reviste especial interés biológico por su posición evolutiva basal y metabolismo simplificado; por esta razón es importante estudiar el metabolismo del NAD+ en este organismo y así conocer sus diferencias con otros modelos de estudio. El Dinucleótido de Adenina y Nicotinamida (NAD+) es una molécula de relevancia metabólica y celular que actúa como cofactor, sustrato y participa en procesos de transducción de señales intracelulares. Las distintas rutas de síntesis de este metabolito convergen en la enzima Nicotinamida/Nicotinato Mononucleotido Adenililtransferasa (NMNAT) (EC: 2.7.7.1/18). En estudios previos se identificaron por herramientas bioinformáticas dos candidatos para la NMNAT de G. lamblia (GlNMNAT-A y GlNMNAT-B); los cuales se clonaron, expresaron y evaluaron enzimáticamente. En el presente trabajo se continuó el estudio de la GlNMNAT-A, mediante aproximaciones bioinformáticas y experimentales. Específicamente, se generó un modelo estructural in sillico y se evaluó la expresión de esta proteína, mediante retro-transcripción. Adicionalmente, se realizaron estudios de inmunodetección; para lo cual se produjeron anticuerpos policlonales en modelos murinos y aviares (IgG e IgY). De igual manera, se estudió la localización intracelular de la GlNMNAT-A, mediante el empleo de transgenes. El modelo bioinformático generado presentó características representativas de las NMNAT, fundamentales para la función biosintética de estas enzimas. El análisis transcripcional mostró una baja expresión de las isoenzimas en trofozoitos de G lamblia. Finalmente, los análisis de localización mostraron patrones de ubicación citoplasmática de la GlNMNAT-A en trofozoítos y quistes del parásito. |
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