Activación del sensor IRE1α de la Respuesta a proteínas mal plegadas (“Unfolded protein response”, UPR) en células dendríticas intratumorales
Las células dendríticas (DCs) han surgido como atractivas candidatas en inmunoterapia del cáncer, debido su alta plasticidad y a su capacidad de regular la inmunidad adaptativa. Siendo el principal organelo responsable de la síntesis de proteínas, el retículo endoplasmático (RE) es un foco central e...
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2019 |
| País: | Chile |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.anid.cl:10533/237799 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/10533/237799 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Medicina y Ciencias de la Salud Medicina Básica Inmunología |
| Sumario: | Las células dendríticas (DCs) han surgido como atractivas candidatas en inmunoterapia del cáncer, debido su alta plasticidad y a su capacidad de regular la inmunidad adaptativa. Siendo el principal organelo responsable de la síntesis de proteínas, el retículo endoplasmático (RE) es un foco central en el inicio de la respuesta inmune, ya que contribuye a procesos inmunológicos claves que incluyen la regulación de rutas de presentación de antígenos, la diferenciación de células inmunes de naturaleza secretora, y el control de la inflamación mediante la producción de citoquinas. Notablemente, el crecimiento de diversos tipos de tumores expone señales capaces de inducir la acumulación de proteínas mal plegadas en el lumen del RE de células inmunes, lo que origina estrés de RE, activando una cascada de señalización intracelular conocida como respuesta a proteínas mal plegadas o UPR por su sigla en inglés “Unfolded Protein Response”. La UPR es una vía transducción de señales de tres ejes responsable de mantener la homeostasis proteica en el RE, ya que ha demostrado controlar procesos cruciales en la biología de las DCs tales como la arquitectura del RE, expresión de integrinas y presentación antigénica. Por esta razón, la manipulación de la UPR podría ser una estrategia prometedora para modular la función de DCs durante la activación de la respuesta inmune anti-tumoral. En este trabajo, se estudió cómo el nicho del tumor activa el eje de la UPR controlado por el sensor IRE1α y su factor de transcripción XBP-1s, en DCs infiltrantes de tumor y linfonodo drenante de tumor (TdLN) en un modelo murino de melanoma inducido vía inoculación de células B16-OVA de melanoma. Para ello, el trabajo se centró en dos enfoques: Primero se identificaron los subtipos cDC1 y cDC2 que presentaron una activación de la actividad RNasa de IRE1α en el tumor y TdLN mediante citometría de flujo multiparamétrica de 14 colores empleando los ratones transgénicos, ERAI (ER stress Activated Indicator[1]). Los ratones ERAI contienen la secuencia de XBP-1s, la cual es cortada por IRE1α, fusionada a Venus FP, permitiendo la cuantificación de la activación de la enzima in vivo. Segundo, se cuantificó la expresión de genes blanco de XBP-1s y de RIDD en DCs sorteadas de tumor y TdLN, lo cual permitió la cuantificación de la activación de los ejes IRE1α-XBP-1s y IRE1α-RIDD. Nuestros resultados indican altos niveles de actividad RNasa de IRE1a selectivamente en el linaje cDC1s de DCs intratumorales. La consecuencia de esta activación fue evidenciada en una señal ERAI aumentada, cantidades elevadas de ARNm de XBP-1s y disminuida expresión de mRNAs blanco de RIDD, lo cual fue observado de manera selectiva en tumor en comparación a linfonodo drenante. Estos datos indican que el nicho tumoral induce una fuerte activación de la actividad RNasa de IRE1a en cDC1, la cual corresponde a la célula presentadora de antígenos más eficiente de las infiltrantes de tumores. Nuestro trabajo actual está focalizado en identificar cuál rama de la actividad RNasa de IRE1 regula la adquisición de un perfil inmunogénico en las cDC1 de tumor cDC1. |
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