Estudio de la respuesta transcripcional por exposición a cobre de L. monocytogenes cultivada en frío
A la fecha, se desconoce cómo Listeria monocytogenesresponde transcripcionalmente al cobre cuando es cultivada a bajas temperaturas. La identificación de esta respuesta podría ser de ayuda para comprender cómo L. monocytogenes es capaz de adaptarse a los ambientes hostiles. Esta investigación tuvo c...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2018 |
| País: | Chile |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.anid.cl:10533/236600 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/10533/236600 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Ciencias Naturales Otras Ciencias Naturales |
| Sumario: | A la fecha, se desconoce cómo Listeria monocytogenesresponde transcripcionalmente al cobre cuando es cultivada a bajas temperaturas. La identificación de esta respuesta podría ser de ayuda para comprender cómo L. monocytogenes es capaz de adaptarse a los ambientes hostiles. Esta investigación tuvo como propósito comprender la respuesta fenotípica y transcripcional del patógeno alimentario L. monocytogenes a la combinación de los factores de estrés, frío y cobre. En el presente estudio, se determinó la tolerancia (n=15) y la cinética de proliferación (n=6) de aislados de L. monocytogenes cultivados a baja temperatura (8ºC) con diferentes concentraciones de cobre. Los resultados indicaron que todos los aislados de L. monocytogenes presentaron los mismos niveles de tolerancia al cobre. Sin embargo, se observó que los aislados poseen diferentes rendimientos en la proliferación cuando son sometidos a concentraciones sub-inhibitorias de cobre en frío. Las principales diferencias se observaron en la DO600nm máxima alcanzada y en la velocidad de proliferación entre los aislados. Se seleccionó el aislado List2-2 que presentó mayor rendimiento a cobre en frío para estudiar la respuesta transcripcional global de la bacteria cultivada en frío y expuesta a un estrés agudo de cobre (0.5mM). Se observó que 9,2% y 2,6% de los genes cambiaron significativamente su abundancia relativa a 8ºC y 37ºC, respectivamente. A 8ºC solo diez genes presentaron un cambio positivo y a 37oC nueve genes presentaron un cambio positivo. Los resultados sugieren que la disminución en la abundancia de los transcritos, interpretados como represión de genes, es el fenómeno que domina en la bacteria bajo las condiciones experimentales ensayadas. Probablemente, esto responda a una redirección de los recursos energéticos de la bacteria en pos de activar solo los mecanismos diana al estrés presente. Además, los resultados evidenciaron que L. monocytogenes responde a la combinación de frío y cobre como un estrés distinto, y no como a la sumatoria de ambos estímulos. Posteriormente, en otros dos aislados de L. monocytogenes, se cuantificó la expresión relativa de un grupo de 17 genes que mostraron cambios estadísticamente significativos en el análisis de expresión global para evaluar la conservación en la respuesta transcripcional de la bacteria. Se evidenció que tan solo 6 de 17 genes evaluados presentaron cambios significativos en la abundancia de los transcritos y conservaron la dirección del cambio. Las diferencias a nivel de regulación transcripcional podrían ayudar a dar respuesta a las variaciones observadas a nivel fenotípico entre los aislados de L. monocytogenes. Los resultados obtenidos en la presente investigación permiten sugerir que el uso de cobre podría ser efectivo para el control de este patógeno alimentario en la industria. Cabe destacar, que la presente investigación es la primera en evaluar las bases genéticas de la respuesta del patógeno alimentario L. monocytogenes frente al estrés combinado por frío y cobre, lo que contribuye a la comprensión de los mecanismos moleculares empleados por bacterias para enfrentar más de un estrés simultáneamente. |
|---|