Rol de adenosina en la quimioresistencia de Glioblastoma stem-like cekks bajo condiciones de hipoxia.
Glioblastoma (GBM) corresponde al tipo de tumor primario cerebral más común y agresivo. Aunque GBM cuenta con tratamientos bien establecidos, la sobrevida en Chile de estos pacientes no supera los 6 meses debido a que este tipo de cáncer es altamente quimioresistente. En este tumor se ha descrito la...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2019 |
| País: | Chile |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.anid.cl:10533/237759 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/10533/237759 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Ciencias Naturales Otras Ciencias Naturales |
| Sumario: | Glioblastoma (GBM) corresponde al tipo de tumor primario cerebral más común y agresivo. Aunque GBM cuenta con tratamientos bien establecidos, la sobrevida en Chile de estos pacientes no supera los 6 meses debido a que este tipo de cáncer es altamente quimioresistente. En este tumor se ha descrito la presencia de una población celular con fenotipo auto renovante y multipotente conocida como Glioblastoma stem-like cells (GSCs). Estas células son intrínsecamente quimioresistentes y parecen tener un rol fundamental en la resistencia a drogas. El fenómeno de múltiple resistencia a drogas (MDR) se debe principalmente a la actividad de transportadores miembros de la familia ATP Binding Cassette (ABC) que expulsan al espacio extracelular las drogas antineoplásicas. Nosotros hemos establecido que en GSCs, MRP1es el transportador de mayor expresión y actividad, cuya regulación es modulada positivamente por el nucleósido adenosina a través de la activación de su receptor A3. Dentro del tumor, las GSCs se pueden encontrar en nichos hipóxicos, siendo la hipoxia un factor que se ha asociado a un fenotipo quimioresistente en diversos modelos tumorales. Se ha demostrado que la expresión de genes de respuesta a hipoxia, dentro de los cuales se incluyen genes de resistencia a drogas y supervivencia, puede ser regulada por los factores de transcripción HIF-1α y HIF-2α. También, hemos descrito que en hipoxia se induce la expresión de un transportador muy poco estudiado, el transportador MRP3; que tiene un alto grado de homología con MRP1, además de compartir algunos sustratos. Sin embargo, muy poco se sabe acerca de la regulación de este transportador y su impacto en la resistencia a drogas en GSCs. Adicionalmente, es sabido que en hipoxia el nucleósido adenosina aumenta su biodisponibilidad a concentraciones suficientes como para activar a su receptor de más baja afinidad, el receptor A2B. Este receptor se ha asociado a importantes procesos fisiopatológicos, incluso en GSCs, pero no se ha descrito anteriormente si en hipoxia este receptor podría regular la expresión de transportadores ABC involucrados en el fenotipo MDR. Por lo tanto, el objetivo principal de este estudio fue determinar el rol que cumple A2B en el fenotipo de resistencia múltiple a drogas mediante la expresión los transportadores ABC MRP1 y MRP3 en GSCs bajo condiciones de hipoxia. Nuestros resultados nos indican que los transportadores MRP1 y MRP3 se expresan de manera diferencial en GSCs dependiendo de las condiciones de normoxia o hipoxia. Adicionalmente, los efectos citotóxicos de las drogas sustratos de estos transportadores fueron significativamente menores en hipoxia. A su vez, bajo condiciones de hipoxia hay un 20% más actividad de transportadores MRPs que en normoxia. Demostramos que el bloqueo con el antagonista de A2B, MRS1754, y el silenciamiento del receptor de adenosina A2B disminuye la expresión de MRP3 en hipoxia. Además, el bloqueo de este receptor provocó una disminución en la capacidad de extrusión dependiente de MRPs de las GSCs hipóxicas. A su vez, tratamientos con MRS1754 en combinación con la droga antitumoral sustrato de MRP3, tenipósido, logró revertir el fenotipo más resistente de las GSCs en hipoxia, promoviendo apoptosis. Por otro lado, Nuestros resultados sugieren que la expresión de MRP1 y MRP3 en GSCs son regulados de manera diferencial por la vía PI3K/Akt, en un proceso independiente de HIF-2α. En conjunto, esta tesis sugiere que bajo condiciones de hipoxia, las GSCs adquieren un fenotipo más resistente mediante la expresión de MRP3 que estaría apoyando a MRP1 en la extrusión de drogas antitumorales, mecanismo que sería modulado a través de la activación del receptor A2B. Estos resultados además permiten sugerir al receptor de adenosina A2B como diana farmacológica para poder atacar a GSCs hipóxicas, debido a que demostramos que tanto la modulación farmacológica como la genética es capaz de revertir y sensibilizar a las GSCs al tratamiento con la droga sustrato de MRP3. |
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