Toxicidad del telurito de potasió (k2teo3) en escherichia coli: un daño de tipo oxidativo.
El telurito de potasio (K2TeO3) es tóxico para la mayoría de los seres vivos y las razones bioquímicas de su toxicidad son hasta ahora desconocidas. El presente trabajo se centró en este problema utilizando Escherichia coli como modelo experimental. Se observó que al crecer estas células en presenci...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2008 |
| País: | Chile |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.anid.cl:10533/175901 |
| Acceso en línea: | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ https://hdl.handle.net/10533/175901 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Sumario: | El telurito de potasio (K2TeO3) es tóxico para la mayoría de los seres vivos y las razones bioquímicas de su toxicidad son hasta ahora desconocidas. El presente trabajo se centró en este problema utilizando Escherichia coli como modelo experimental. Se observó que al crecer estas células en presencia de K2TeO3, la reducción intracelular del oxianión a su forma elemental (Te °) genera una respuesta antioxidante generalizada, en que actividades enzimáticas como superóxido dismutasa (SOD) y catalasa (CAT) están claramente inducidas a tiempos tempranos de tratamiento. Del mismo modo, se observó la inducción de la expresión de conocidos marcadores de estrés oxidativo como soxS, sodA, fumC y sufS. Además, utilizando la sonda fluorogénica dihidroetidina (DHE) se detectó específicamente la producción de superóxido (02) en células crecidas en presencia de Te0 32 . Por otra parte, a partir de extractos crudos de células tratadas con Te032se ensayó las enzimas fumarasa A (FumA) y aconitasa B (AcnB), particularmente sensibles a estrés oxidativo. Los resultados obtenidos con células crecidas aeróbicamente en presencia del tóxico demuestran una pérdida de más de 90 % de estas actividades respecto al control sin tratamiento. Interesantemente no se observa el mismo efecto para células crecidas en presencia de K2TeO3en anaerobiosis. Un análisis de espectroscopia de resonancia paramagnética (EPR) de una fracción purificada de fumarasa A de E. coli expuesta a un sistema reductor de Te032 in vitro, mostró la señal característica de un centro catalítico de tipo [4Fe-4S] inactivado oxidativamente. Mediante ensayos espectroscópicos con quelantes específicos de Fe 24, se comprobó la liberación de ión ferroso desde la fracción purificada de FumA expuesta al sistema reductor de telurito, demostrando que este tóxico es capaz de inactivar este tipo de enzimas por oxidación de su centro catalítico con la consecuente pérdida de Fe 21 y desintegración del grupo prostético. Los resultados obtenidos permitieron concluir que la toxicidad del K2TeO3 en E. coli dice relación con el establecimiento de un estrés de tipo oxidativo. |
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