Expresión y funciónes neurales de la variante digs97 del gen dlg de drosophila

Las proteínas citoplasmáticas de andamio se caracterizan por poseer dominios modulares de interacción proteína-proteína que forman complejos proteicos de alto peso molecular y que están ancladas a regiones de la membrana plasmática a través de su interacción con proteínas de membrana. Una superfamil...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Mendoza-Topaz, Carolina Andrea
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2006
País:Chile
Idioma:español
OAI Identifier:oai:repositorio.anid.cl:10533/179299
Acceso en línea:http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/
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description Las proteínas citoplasmáticas de andamio se caracterizan por poseer dominios modulares de interacción proteína-proteína que forman complejos proteicos de alto peso molecular y que están ancladas a regiones de la membrana plasmática a través de su interacción con proteínas de membrana. Una superfamilia de proteínas andamio conservadas evolutivamente son las llamadas guanilato quinasas asociadas a membrana (MAGUK). Las proteínas de esta familia que se expresan en neuronas agrupan receptores y canales iónicos en la membrana sináptica, organizan las vías de transducción de señales y modulan la plasticidad sináptica. Aunque se ha sugerido la participación de las MAGUKs en neurogénesis no existe evidencia genética contundente que lo apoye. La primera caracterización molecular de un miembro de esta familia fue discs-Iarge (dlg) de Drosophila. dlg es un gen supresor de tumores, que mantiene la adhesión y polaridad celular, regula la estructura y función sinóptica de la sinapsis neuromuscular, y localiza determinantes de destino neural durante la división asimétrica de los precursores neurales. Todas estas funciones han sido atribuidas al único transcrito de dlg bien caracterizado, Dlg-A. Sin embargo existen múltiples variantes de procesamiento alternativo de d/g, algunas de las cuales como dlgS97, poseen un dominio de interacción proteína-proteína llamado L27. Considerando que experimentos previos de pérdida de función por inyección de un dsRNA dirigido contra la región del dominio L27 de dlgS97 indican una participación de DIgS97 en la migración axonal embrionaria y el hecho de que DIgS97 se expresa específicamente en neuronas y no en epitelio, en esta tesis nos propusimos estudiar en detalle la expresión de DIgS97 de Drosophila y analizar sus funciones neuronales. Para cumplir con este objetivo general se analizó la expresión de los transcritos y de las proteínas derivados de dlg, los efectos de la pérdida y ganancia de función durante el desarrollo embrionario, y finalmente se generaron y analizaron mutantes nulas de dlgS97. En conjunto, los resultados obtenidos de esta tesis muestran que: (1) Existe una regulación de la expresión temporal y espacial diferente para las variantes de procesamiento DIgA y DIgS97, siendo la primera de expresión principalmente epitelial y neurona¡ con un fuerte componente materno, y la segunda de expresión cigótica y principalmente neurona¡. (2) DIgS97 se expresa en un grupo heterogéneo de neuronas maduras y no en los precursores neurales, donde se expresa DIgA. (3) DlgS97 es prescindible para el desarrollo del individuo hasta la edad adulta. (4) La pérdida o la ganacia de función de DIgS97 no afecta el correcto desarrollo del sistema nervioso ni la migración axonal. (5) Las mutantes de DlgS97 presentan defectos conductuales que afectan la velocidad de la respuesta locomotora frente a un estimulo luminoso, los que pueden ser originados en el procesamiento de la información en las sinapsis centrales. De acuerdo a lo anterior, se concluye que la variante DIgS97 por sí sola no es necesaria para el desarrollo del sistema nervioso, pero no descartamos que pudiera serlo en conjunto con DIgA. Por otra parte, las mutantes de DlgS97 generadas en esta tesis son el material de partida para analizar la función del dominio L27 de las proteínas MAGUKs en neuronas.
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En conjunto, los resultados obtenidos de esta tesis muestran que: (1) Existe una regulación de la expresión temporal y espacial diferente para las variantes de procesamiento DIgA y DIgS97, siendo la primera de expresión principalmente epitelial y neurona¡ con un fuerte componente materno, y la segunda de expresión cigótica y principalmente neurona¡. (2) DIgS97 se expresa en un grupo heterogéneo de neuronas maduras y no en los precursores neurales, donde se expresa DIgA. (3) DlgS97 es prescindible para el desarrollo del individuo hasta la edad adulta. (4) La pérdida o la ganacia de función de DIgS97 no afecta el correcto desarrollo del sistema nervioso ni la migración axonal. (5) Las mutantes de DlgS97 presentan defectos conductuales que afectan la velocidad de la respuesta locomotora frente a un estimulo luminoso, los que pueden ser originados en el procesamiento de la información en las sinapsis centrales. De acuerdo a lo anterior, se concluye que la variante DIgS97 por sí sola no es necesaria para el desarrollo del sistema nervioso, pero no descartamos que pudiera serlo en conjunto con DIgA. 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