Estudo de proteínas antigênicas do Treponema pallidum
A incidência de sífilis tem aumentado de forma preocupante nas últimas décadas, com uma estimativa de 6 milhões de novos casos por ano no mundo. O diagnóstico da sífilis continua um desafio, devido à dificuldade de cultivo in vitro do Treponema pallidum. Nos últimos anos, novos testes treponêmicos t...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2019 |
| País: | Brasil |
| Institución: | Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD) |
| Repositorio: | Repositório Institucional da UFGD |
| Idioma: | portugués |
| OAI Identifier: | oai:https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui:prefix/2300 |
| Acceso en línea: | http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/2300 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Treponema pallidum CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERAL Sífilis Testes sorológicos Antígenos recombinantes Syphilis Serologic tests Recombinant antigens |
| Sumario: | A incidência de sífilis tem aumentado de forma preocupante nas últimas décadas, com uma estimativa de 6 milhões de novos casos por ano no mundo. O diagnóstico da sífilis continua um desafio, devido à dificuldade de cultivo in vitro do Treponema pallidum. Nos últimos anos, novos testes treponêmicos têm sido desenvolvidos, utilizando antígenos recombinantes de T. pallidum. Esta abordagem conferiu uma maior especificidade e sensibilidade para a triagem dos pacientes com sífilis. No entanto, a busca por novos antígenos é fundamental para desenvolvimeno de um diagnóstico sorológico mais eficiente para detecção do T. pallidum. O objetivo desse estudo foi a produção dos antígenos recombinantes para diagnóstico sorológico da sífilis. A seleção dos antígenos foi baseada em estudos proteômicos com auxílio dos programas de bioinformática. Três genes que codificam para as proteínas Tp0684, Tp0750 e Tp0792 foram selecionados e submetidos síntese química, clonados no vetor pAE; as proteínas foram expressas em E. coli BL21 StarTM e purificadas por cromatografia de afinidade. A antigenicidade das proteínas recombinantes rTp0684, rTp0750 e rTp0792 foram avaliadas através da técnica de Western blot e ELISA com soros de pacientes com sífilis primária (n = 6), sífilis latente (n = 34) e soros controles não infectados (n = 10). As três proteínas recombinantes foram reconhecidas pelos soros de pacientes com sífilis primária e sífilis latente nas técnicas Western blot e ELISA, demonstrando serem antigênicas. Estes resultados indicam que os antígenos produzidos têm potencial para serem utilizados no desenvolvimento de testes sorológicos para a triagem de pacientes com sífilis. Além disso, a estratégia de utilização de proteínas recombinantes pode garantir um incremento na especificidade dos testes sorológicos reduzindo a ocorrência de resultados falsos positivos. Por outro lado possibilita um estudo racional de alvos com alta sensibilidade, diminuindo de forma significativa resultados falsos negativos e positivos. |
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