Caracterização da proteína parkina em espermatozoides murinos e sua influência no desenvolvimento embrionário
Objetivo: Avaliar o papel da proteína Parkina na distribuição das mitocôndrias paternas após a fertilização in vitro. Métodos: Foram utilizados camundongos C57BL / 6 normais e nocaute para PARK2 para promover deleção da proteína Parkina. Dos machos foram coletados espermatozoides para a avaliação da...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2022 |
| País: | Brasil |
| Institución: | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
| Repositorio: | Repositório Institucional da UNIFESP |
| Idioma: | portugués |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.unifesp.br:11600/63993 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/11600/63993 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Fertilização in vitro Mitocôndrias Desenvolvimento embrionário Espermatozoide Mitofagia |
| Sumario: | Objetivo: Avaliar o papel da proteína Parkina na distribuição das mitocôndrias paternas após a fertilização in vitro. Métodos: Foram utilizados camundongos C57BL / 6 normais e nocaute para PARK2 para promover deleção da proteína Parkina. Dos machos foram coletados espermatozoides para a avaliação da função espermática (concentração, motilidade, fragmentação do DNA dos espermatozoides e atividade mitocondrial), e análise da ubiquitinação e presença de Parkina, além da coleta de espermatozoides para a fertilização in vitro. As fêmeas foram estimuladas com hormônios para a indução da ovulação e delas foram coletados os oócitos para a fertilização in vitro. Com a fertilização pretendeu-se avaliar a presença das mitocôndrias paternas nos embriões e se a ausência de Parkina gera déficit na degradação de mitocôndrias paternas pela via de degradação proposta. Resultados: Não foram observadas diferenças significativas quanto aos parâmetros seminais e funcionais dos espermatozoides em ambos os grupos (p>0,05). Identificamos a proteína Ubiquitina na peça intermediária e região acrossomal dos espermatozoides e a proteína Parkina em toda a extensão desta célula. Observou-se diminuição na intensidade de marcação das proteínas Ubiquitina e Parkina nos espermatozoides de machos nocaute (p<0,05). Quanto à segregação mitocondrial, observamos que ela é dependente do tempo após a fertilização e sofre efeito da mutação no gene da PARK2, onde a união dos gametas entre uma fêmea nocaute e um animal controle demonstrou maior déficit na degradação mitocondrial. Conclusões: A proteína Parkina está presente em todo o espermatozoide e a diminuição da sua expressão no oócito impacta negativamente a fertilização e a eliminação de mitocôndrias paternas no zigoto após a fertilização in vitro. |
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