Alérgenos recombinantes de Blomia tropicalis e Dermatophagoides pteronyssinus como possíveis marcadores de gravidade para doenças alérgicas
Introdução: As alergias aos ácaros da poeira doméstica, como Blomia tropicalis e Dermatophagoides pteronyssinus, representam um importante problema de saúde pública. A caracterização molecular e imunológica de alérgenos dessas duas espécies é crucial para aplicações clínicas. Objetivos: Expressar e...
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2025 |
| País: | Brasil |
| Institución: | Universidade Federal da Bahia (UFBA) |
| Repositorio: | Repositório Institucional da UFBA |
| Idioma: | portugués |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.ufba.br:ri/43008 |
| Acceso en línea: | https://repositorio.ufba.br/handle/ri/43008 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE Alergia a Ácaros Ácaros da poeira doméstica Proteínas recombinantes Alergia Blo t 41 Der p 20 Blomia tropicalis Dermatophagoides pteronyssinus Biomarcadores Dust Mite Allergy House dust mite Recombinant Proteins Allergy Biomarkers |
| Sumario: | Introdução: As alergias aos ácaros da poeira doméstica, como Blomia tropicalis e Dermatophagoides pteronyssinus, representam um importante problema de saúde pública. A caracterização molecular e imunológica de alérgenos dessas duas espécies é crucial para aplicações clínicas. Objetivos: Expressar e purificar os alérgenos Blo t 41 e Der p 20 e comparar a reatividade IgE desses dois alérgenos em um coorte de pacientes alérgicos aos ácaros B. tropicalis e D. pteronyssinus. Materiais e Métodos: As sequências dos genes do Blo t 41 e Der p 20 foram clonadas em vetores pET21a(+) e expressas em E. coli BL21(DE3). Após teste de solubilidade, foi feita a purificação por cromatografia por troca iônica e exclusão por tamanho. A funcionalidade do Blo t 41 foi confirmada por ligação à quitina, rBlo t 41 e rDer p 20 passaram por um teste de estabilidade em temperatura ambiente e 4 ºC com amostras periódicas coletadas e a reatividade IgE foi determinada por ELISA indireto usando 222 soros de pacientes asmáticos alérgicos. Resultados e Conclusão: A expressão de rBlo t 41 (13 kDa) e rDer p 20 (40 kDa) foi bem-sucedida e confirmada. No teste de estabilidade do alérgeno rDer p 20 mostrou-se termicamente estável a temperatura ambiente e a 4ºC, já rBlo t 41 mostrou mais resistente a temperatura ambiente. O ensaio de ligação à quitina confirmou que rBlo t 41 é uma proteína funcional de ligação à quitina. Na análise sorológica, rBlo t 41 apresentou maior reatividade (59% em alérgicos; 18% em asmáticos alérgicos) que Der p 20 (37% e 12%, respectivamente), sendo identificado como um alérgeno majoritário de B. tropicalis. Der p 20 correlacionou-se fortemente com extratos de D. pteronyssinus em asmáticos leves. E. coli BL21(DE3) mostrou-se eficaz como vetor de expressão para produzir rBlo t 41 e rDer p 20 com alto rendimento. Considerando a capacidade de ligação a IgE em soros de pacientes alérgicos aos ácaros, esses alérgenos recombinantes podem ser utilizados em aplicações diagnósticas e explorados como potenciais marcadores de gravidade da doença. |
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