Estudo funcional da proteína RNF-113A (ZNF183) no spliceossomo em células de mamíferos.

O splicing do pré- RNAm é o processo pelo qual os introns são removidos e os exons são unidos para produzir um RNAm maduro. Esse processo é catalisado por um complexo denominado spliceossomo. RNF113A é uma proteína detectada em complexos pré- e pós-catalíticos. Neste trabalho analisamos a participaç...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Silva, Guilherme Henrique Gatti da
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2017
País:Brasil
Institución:Universidade de São Paulo (USP)
Repositorio:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Idioma:portugués
OAI Identifier:oai:teses.usp.br:tde-10072017-095618
Acceso en línea:http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-10072017-095618/
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Splicing
Células cultivadas de tumor
CRISPR/Cas9
RNA
RNF113A
Tumor culture cells
ZNF183
Descripción
Sumario:O splicing do pré- RNAm é o processo pelo qual os introns são removidos e os exons são unidos para produzir um RNAm maduro. Esse processo é catalisado por um complexo denominado spliceossomo. RNF113A é uma proteína detectada em complexos pré- e pós-catalíticos. Neste trabalho analisamos a participação de RNF113A no spliceossomo de mamíferos e suas interações com outros componentes do spliceosomo. Nossos resultados mostraram que a super- expressão de RNF113A em células HEK293T aumentam o nível dos snRNAs U1, U2, U5 e U6 e de PRPF19. A imunoprecipitação de RNF113A revelou maior concentração de PRPF19, hBRR2 e SF3b2. Além disso, observamos maior quantidade dos snRNAs U5 e U6 associados à RNF113A. As frações de imunoprecipitação foram analisadas por espectrometria de massas e mostraram interação de RNF113A com proteínas que participam na transcrição, ubiquitinação, maturação do pré-RNAm e splicing. Estes resultados indicam que a associação de RNF113A ao spliceossomo ocorre a partir de suas interações com os snRNAs U5 e U6 e com proteínas relacionadas, como a hBRR2.