Caracterização de um clone selecionado a partir de biblioteca de cDNA de verme adulto com anticorpos anti-Schistosoma mansoni dissociados de imunocomplexos
Considerando a escassez de antígenos quimicamente definidos, realmente úteis e confiáveis para aplicação na soroepidemiologia da esquistossomose em larga escala, foi proposto, neste trabalho, um método alternativo para a seleção de clones de cDNA que expressam proteínas com putativo potencial diagnó...
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| Formato: | artículo |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2007 |
| País: | Brasil |
| Recursos: | Instituto de Medicina Tropical (IMT) |
| Repositorio: | Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo |
| Idioma: | inglés |
| OAI Identifier: | oai:revistas.usp.br:article/31087 |
| Acesso em linha: | https://www.revistas.usp.br/rimtsp/article/view/31087 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palavra-chave: | Schistosoma mansoni cDNA library Immunoscreening DNA sequencing Synthetic peptides |
| Resumo: | Considerando a escassez de antígenos quimicamente definidos, realmente úteis e confiáveis para aplicação na soroepidemiologia da esquistossomose em larga escala, foi proposto, neste trabalho, um método alternativo para a seleção de clones de cDNA que expressam proteínas com putativo potencial diagnóstico na esquistossomose. Empregando anticorpos específicos contra uma fração proteica de 31/32 kDa (Sm31/32), purificados através da dissociação de imunocomplexos, foram selecionados cinco clones de cDNA a partir de genoteca de verme adulto de Schistosoma mansoni. O seqüenciamento parcial destes clones demonstrou que todos eram relacionados ao S. mansoni: dois apresentaram homologia com a proteína de choque térmico de 70 kDa e os demais com glutationa S-transferase, "homeodomain protein" e uma etiqueta de seqüência expressa (EST). Este último foi o clone que melhor reagiu, durante o processo de seleção, com os anticorpos anti-Sm31/32 dissociados de imunocomplexos. Baseado na seqüência de aminoácidos deste clone, dois peptídeos foram quimicamente sintetizados e analisados separadamente frente a misturas de soros de indivíduos normais e de pacientes com esquistossomose mansoni. Ambos os peptídeos demonstraram uma intensa reatividade somente contra a mistura de soros positivos, sugerindo que estes peptídeos podem ser úteis como antígenos para o diagnóstico da esquistossomose mansoni. |
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