Las células madre pluripotentes son propagadas en un medio de cultivo novedoso que preserva sus propiedades fundamentales y aumenta su proliferación, asociada a la presencia de una isoforma de fibronectina que incluye el exón EDA
Las células madre (CM) pluripotentes, entre ellas, las CM embrionarias (CME) y CMpluripotentes inducidas (CMPI) son capaces de propagarse indefinidamente en cultivo y dediferenciarse a todos los tipos celulares del organismo. Encontramos un medio de cultivoque permite su propagación, preservando sus...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2013 |
| País: | Argentina |
| Institución: | Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
| Repositorio: | Biblioteca Digital (UBA-FCEN) |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | tesis:tesis_n5287_Losino |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5287_Losino |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | CELULAS MADRE EMBRIONARIAS CELULAS MADRE PLURIPOTENTES INDUCIDAS AUTO-RENOVACION PLURIPOTENCIA PROLIFERACION MEDIO CONDICIONADO FIBRONECTINA EMBRYONIC STEM CELLS INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS SELF-RENEWAL PLURIPOTENCY PROLIFERATION CONDITIONED MEDIUM FIBRONECTIN |
| Sumario: | Las células madre (CM) pluripotentes, entre ellas, las CM embrionarias (CME) y CMpluripotentes inducidas (CMPI) son capaces de propagarse indefinidamente en cultivo y dediferenciarse a todos los tipos celulares del organismo. Encontramos un medio de cultivoque permite su propagación, preservando sus propiedades básicas, evaluadas por análisis deexpresión de marcadores y diferenciación in vitro e in vivo; y aumentando paralelamente suproliferación. Este medio es condicionado por una línea celular de granulosa bovina,mitogénico sobre otros tipos celulares, adjudicándose dicho efecto a la fibronectina (FN) queincluye el exón EDA (FN+EDA). En este contexto, decidimos analizar si esta isoforma de FN aumenta la proliferación de las CME. Estudiamos los niveles de proliferación de las CME en presencia de EDA exógeno, mediante dos estrategias. Utilizamos medioscondicionados por líneas de fibroblastos embrionarios de ratón genéticamente modificadas,que secretan sólo FN+EDA, FN sin EDA o ambas isoformas. Por otra parte, evaluamos elefecto de un péptido correspondiente a una porción de FN que incluye o no dicho exón. Entodos los casos, observamos que la presencia de este dominio produjo un aumento en laproliferación en CME de ratón y humanas, evaluada por MTT, cristal violeta y ensayos desanado de herida. Esperamos que nuestros hallazgos contribuyan al conocimiento de losmecanismos moleculares involucrados en la proliferación de CM y a la optimización de suscondiciones de cultivo. |
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